- ￥100 - 2000
- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0618
- 2025年11月06日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
SuperHyb Solution for ISH
- 库存：
890
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
原位杂交是在一定生物结构基础之上的核酸杂交。这种结构基础可以是一条染色体；一个细菌；更大结构基础是细胞和组织。基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双键分子，应用带有标记的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非放射性物质）DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内待测核酸（RNA或DNA）片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位；用原位杂交技术，可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性，可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。本产品为xuanya公司开发的即用型原位杂交专用核酸杂交液。既可以用于RNA原位杂交、DNA原位杂交，也可以用于FISH原位杂交等试验。
超级杂交液(原位杂交)运输及保存：
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
自备试剂：盖玻片、等
超级杂交液(原位杂交)使用方法
以检测mRNA序列为例。
培养细胞和冰冻切片
1.玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1MPBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1MPBS（PH7.2-7.6），含有1/1000DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O21份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶（1ml3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀），37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1MPBS（PH7.2-7.6），含有1/1000DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片加20μL预杂交液（提前加入鲑鱼精DNA，终浓度为100ug/ml）。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
超级杂交液(原位杂交)注：靶DNA的变性
DNA-DNA杂交检测中，在杂交前需要增加靶DNA的变性步骤（对mRNA的原位杂交无需此步）。样品DNA的变性可能会造成样品形态学的部分破坏，此步是实验中需要优化的一个步骤。实验时可以摸索变性时间、变性温度等参数以获得最佳条件。可以将探针的变性和样品DNA变性同步进行：将样品和探针溶液加盖盖玻片，置于烘箱80℃变性，处理5-10min，后冷却至37℃进行杂交。
8.杂交——按每张切片20μL杂交液（探针浓度约为1ng/ul；杂交液提前加入鲑鱼精DNA，终浓度为100ug/ml），加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次;37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗。
11.根据探针标记物，选择相应显色方法显色、复染，脱水、封片。
12.结果观察。
超级杂交液(原位杂交)石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%/0.1MPBS（PH7.0-7.6），含有1/1000DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O21份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶（1ml3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀），37℃或室温消化3--30分钟（视标本新旧、厚薄自行调整）。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
5.其余步骤和冰冻切片6-11步相同。
6.结果观察。
超级杂交液(原位杂交)相关产品：
| 葡聚糖凝胶 G-15 |
| 葡聚糖凝胶 G-25 中颗粒 |
| 葡聚糖凝胶 G-50 中颗粒 |
| 葡聚糖凝胶 G-75 中颗粒 |
| 葡聚糖凝胶 LH-20 |
| 琼脂糖凝胶 2B |
| 琼脂糖凝胶 4B |
| 交联琼脂糖凝胶 2B |
| 交联琼脂糖凝胶 4B |
| 交联琼脂糖凝胶 6B |
| L- 丝氨酸 |
| 超级杂交液(原位杂交)莽草酸 |
| 变色硅胶 |
| 芥子酸 |
| 天狼猩 |
| 超氧化物歧化酶 |
| 钠 |
| 氯 |
| 柠檬酸钠，二水 |
| 氢 |
| 十二基肌氨酸钠 |
| 偏钒酸钠 |
| 原钒酸钠，十二水 |
| 琥珀酸钠，六水 |
| 四钠，十水 |
| D- 山梨醇 |
| L- 山梨糖 |
| 盐酸壮观霉素 |
| 四盐酸精 |
| 亚精三盐酸盐 |
| 亚精 ( 精脒 ) |
| 精 |
| S(-) 雷氯必利 (+)- 酒石酸盐 |
| 可溶性淀粉 |
| 超级杂交液(原位杂交)链亲和素 |
| 硫酸链霉素 |
| 链脲佐菌素 |
| 琥珀酸 ( 二酸 ) |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne
近期笔者在整理实验数据时，感觉自己的 Excel 水平真的是菜的抠脚，各种操作都只能用最笨的方法，输数据慢，整理数据也慢，真是心累。痛定思痛，笔者腾出了半天功夫，找了一些好用的 Excel 插件，瞬间效率提升 10 倍，特意来分享给大家一起使用～方方格子方方格子 Excel 工具箱是一款大型 Excel 工具箱软件。优点还是要给大家表一表，操作简单，还可以撤销错误操作，也是很贴心了。另外，这个插件支持 32 位和 64 位的 Office，从 Excel 2007 至 2016 各版本都可以使
超级病菌： 阴沟肠杆菌广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出阴沟肠杆菌是肠道正常菌种之一，但可作为条件致病菌医`学教育网搜集整理医`学教育网搜集整理。随着头孢菌素的广泛使用阴沟肠杆菌已成为医院感染越来越重要的病原菌，其引起�的细菌感染性疾病，常累及多个器官系统，包括皮肤软组织感染、泌尿道感染呼吸道感染以及败血症等健康搜索由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶�耐药情况严重，给临床治疗带来了新的挑战。
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
