- ￥100 - 2000
- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0586
- 2025年11月06日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Random Primer DNA Labeling Kit
- 库存：
890
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒，标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在KlenowDNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成，可用下面的示意图表示：
探针标记及检测产品本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良，具有下列特点：
1.提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分，简化了反应加样步骤，提高了标记反应的可重复性。
2.使用无外切活性的Klenowexo-DNA聚合酶，已标记DNA探针不会被酶降解。
3.快速，最快1小时即可完成标记反应。
4.得到的DNA探针比活性高（如果是同位素，可以达到109cpm/ugDNA）。
5.所需模版DNA量少，可以是各种形状（线状和环状）的、也可以是单链或双链的，但长度必须在100bp以上。
6.得到的探针长度在200-400nt之间，可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7.提供三种标记选择，其中A可用于各种同位素和非同位素标记，但需自备标记底物；B和C可分别用于生物素和标记，不需自备标记底物。
探针标记及检测产品运输及保存：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：0.5MEDTA（pH8.0）。如果是A型，则需要自备标记的核苷酸。
探针标记及检测产品使用方法
1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分：
成分 用量
模板DNA 50-150ng
2×随机引物标记反应液(ABC三种之一) 10uL
超纯水 补水到15uL
探针标记及检测产品注意：非同位素标记基团疏水性强，易与塑料离心管表面非特异性结合，所以要硅化塑料离心管。模板DNA并非越多越好，否则会竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
2.沸水浴5-10分钟，或在PCR仪上100℃加热5-10分钟后立即放冰上待用。
3.高速离心数秒使所有液体集中在管底，根据试剂盒类型加入下列成份：
试剂盒类型 成分及用量
A型 dATP、dGTP、dCTP各1uL（共3uL，浓度均为2mM）自备的2mMdTTP/标记dUTP混合物（见注）1uL 1uLKlenowexo聚合酶
B型 1uLKlenowexo聚合酶 4uL超纯水 不需加dNTP，已经包括在2×随机引物标记反应液（B型）中
C型 1uLKlenowexo聚合酶 4uL超纯水 不需加dNTP，已经包括在2×随机引物标记反应液（C型）中
探针标记及检测产品注：上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM，dTTP与标记dUTP的比例在65：35为最佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸，如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP，则用户需要自己摸索其与dTTP之间的最佳比例，如果使用32P标记的dUTP，则比活最好为3000Ci/mmol，浓度为好为10uCi/uL，并且不需要加入dTTP。
4.轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
5.37℃保温1-20小时。标记效率跟模板量和保温时间相关，具体见下表：
6.加1uL自备的0.5MEDTA（pH8.0）终止反应，加热100℃5分钟使DNA探针变性成单链，然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测，标记产物将是弥散状态。立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要
探针标记及检测产品注意：本方法标记核苷酸掺入率极高，因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化，注意不要用酚抽提法纯化非同位素标记的DNA探针，因为这些标记分子疏水性强，能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失，但可以用乙醇沉淀和SephadexG50回收（可另购柱式探针纯化试剂盒）。对比活高的同位素标记探针，由于同位素其极其不稳定，因此应该立即使用，不要长久放置。
探针标记及检测产品相关产品：
| 氯萘酚溶液，3mg/mL |
| CN/DAB 底物套装 |
| ABTS 溶液，7mM |
| OPD 干粉 |
| pNPP 干粉 |
| ONPG 干粉 |
| PVDF 膜，0.45μm，13×20cm |
| 氨基黑染膜液 |
| 丽春 S 染膜液 |
| 湿法电转液 ( 干粉 ) |
| 半干法电转液 ( 干粉 ) |
| Western 印迹膜封膜液 ( 尼龙膜 ) |
| Western 印迹膜封膜液 (NC 膜和 PVDF 膜 ) |
| 探针标记及检测产品印迹膜抗体稀释液 |
| Western 印迹膜抗体清除剂 |
| Western 印迹膜抗体清除剂 |
| Western 印迹膜洗膜液 |
| 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP) |
| 四氮唑蓝 (NBT) |
| BCIP/NBT 显色试剂盒 |
| 预混型 BCIP/NBT 溶液 |
| 增强型 DAB 显色试剂盒 |
| 沉淀型 TMB 显色试剂盒 |
| 一管式 TMB 显色液 A( 可溶型 ) |
| 一管式 TMB 显色液 B ( 沉淀型 ) |
| 超敏化学发光 (HRP) 检测试剂盒（ECL） |
| 超敏化学发光 (HRP) 检测试剂盒（ECL） |
| 超敏化学发光（HRP）检测试剂盒 2.0 |
| 超敏化学发光（HRP）检测试剂盒 2.0 |
| 超敏化学发光 (AP) 检测试剂盒（ECL） |
| 鲁米诺 |
| AMPPD |
| 探针标记及检测产品乙烯乙二醇 |
| HRP 稳定剂 / 稀释剂 |
| β-Actin 小鼠单抗 |
| β-Actin 小鼠单抗 |
| α-Actin 小鼠单抗 |
| α-Actin 小鼠单抗 |
| β-Tubulin 小鼠单抗 |
| β-Tubulin 小鼠单抗 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验检测方法 对于探针和靶序列杂交之后的检测，我们通常使用碱性磷酸酶（AP）耦联的抗体，采用显色法或化学发光法检测。在碱性磷酸酶的底物中，我们使用CDP-Star或CSPD用于化学发光法检测，NBT/BCIP用于显色法检测。同时，对于膜杂交中的化学发光信号的检测，建议使用Lumi-Film以获得最理想的信号。 检测底物 即用型CDP
1.实验目的： 通过细胞的体外培养来检测产品的生物性能是否达到要求。 2.实验原理： 体外培养的细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。通过贴壁细胞的传代培养，观察细胞的生长状态可以反映出培养产品是否达到细胞培养的要求。 3.实验材料：
方法。 关键词：针剂玻璃瓶、西林瓶、安瓿瓶、残氧量、顶空分析、残氧检测 作者：济南兰光机电技术有限公司 背景： 针剂指一种药物剂型，是皮下、肌肉、静脉注射用药。针剂玻璃瓶产品主要是指以玻璃瓶为包装的针剂药品，市面上常见的包装有安瓿瓶和西林瓶。安瓿瓶是一种密封性良好的高质量薄玻璃瓶，常用于存放注射用药液以及疫苗、血清等药品，容量一般为1~25ml。西林瓶是一种用胶塞封口的小瓶子，常用于粉针剂、注射用药液、口服液的存放，根据内容物的不同，颜色有棕色和透明色之分，一般采用玻璃材质制成
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
