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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Column PAGE DNA BACK
- 库存:
890
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
聚凝胶电泳(PAGE)是目前分离小片段DNA的主要方法,但是目前市场上没有专门的产品用于从聚凝胶中回收DNA片段,本产品就是xuanya专门为此用途而开发的、从PAGE凝胶中回收DNA片段的试剂盒。它具有下列特点:
1.高效,采用高效的溶液使DNA快速从PAGE中扩散出来,使回收效率50-90%(跟片段大小和胶浓度等因素有关)。
2.可回收50bp-500bp的DNA片段(如果片段长度超过5100bp,建议使用琼脂糖分离回收方法)。本产品也能回收单链DNA。
3.操作简单,整个过程只需要离心机,不需要其他设备。
4.纯度高,采用能专一结合DNA的硅胶膜是杂质和DNA分离,回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。
5.储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。

柱式DNA PAGE胶回收试剂盒运输及保存:
常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短期),有效期一年。
自备试剂:PAGE胶
柱式DNA PAGE胶回收试剂盒使用方法
1.切取含DNA片段的PAGE凝胶(100mg左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入1.5mL离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
2.按重量比为1:2的比例加入溶液A(100mgPAGE凝胶需要加入200uL溶液A)。
3.将离心管水平放置并室温摇晃1-10个小时以让DNA从PAGE凝胶中扩散出来。如果DNA片段超过500bp,摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃,DNA扩散速度会增加。
4.12000-15000g室温离心2分钟,将含DNA的上清液转移到新的离心管中。
5.再用100uL的溶液A洗涤凝胶一次并与上步得到的上清合并。
6.加入900uL通用溶胶液和0.3mL溶液B,混合均匀后将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置3分钟,然后再12000-15000g离心1分钟,倒掉收集管中的液体。
7.加入600-800uL通用洗柱液于离心柱中。
8.12000-15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
9.12000-15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
10.将离心吸附柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入25-50uL通用洗脱液,静置3分钟。11.12000-15000g离心1分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
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文献和实验江janice 求助:用的是天根 的胶回收试剂盒,11管PCR产物,差不多500微升的总体积,上四个孔电泳,电泳后用天根的盒子回收到四个EP管,每管40微升,取5微升电泳,居然没有成功,又取10微升电泳还是没有任何条带,不知道可否有人用天根的盒子,是否遇到这方面的问题,一般100微升的PCR产物,回收到多少体积比较恰当,纠结啊,回收了好几次电泳都没有目的条带,盒子是刚买的新盒子,谢谢好心人帮助 大鹏鸟 天根的盒子还是很好
里的DNA条带,并将成功的方法反馈给Qiagen。于是Qiagen公司发布了User-Developed Protocol,虽然Qiagen说并未经最严格的彻底验证和优化,不过既然声誉卓著的厂家肯公开发布,毫无疑问已经证实是可行的了。生物通小编在这里特别推荐给大家,从此,你可以用常规的胶回收试剂盒来对付PAGE胶里的DNA条带,而不需另外购买一个Kit或者苦恼其他复杂的方法啦。 自配溶液:diffusion buffer: 0.5 M ammonium acetate; 10 mM
频率。我们的 SSR 有很多优点呀,比如在真核生物基因组中分布较为广泛(植物中平均每 20~30 Kb 就会出现一个SSR)、可以轻松鉴别纯合子杂合子(微卫星共显性遗传)、所需 DNA 量较少(单位以 ng/ul 计)、成本较低等。我们实验室即是采用图位克隆的方法,对模式生物——水稻进行基因定位与克隆的。我们分离 PCR 产物用的是 8% 的丙烯酰胺凝胶电泳,一直效果不错,新生刚来的时候,就是从学习提水稻 DNA、扩 PCR、跑 SSR PAGE 胶(俗称「跑槽」,233333)开始进行基因的图位克隆的。理想
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