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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 英文名:
Viral Nervous Necrosis Virus(VNNV)RTPCR
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
1.病毒性神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
需要自备的器材:点击了解更PCR检测试剂盒。
1.病毒性神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
| 产品名称 | 病毒性神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书 |
| 英文名称 | Viral Nervous Necrosis Virus(VNNV)RTPCR |
| 编号 | CP913754 |
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1.病毒性神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
反应五要素:
病毒性神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
(S)-(-)-Acenocoumarol (5 mg)4-hydroxy-3-[(1S)-1-(4-nitrophenyl)-3-oxobutyl]-2H-1-benzopyran-2-one; (S)-(-)-Acenocoumarin|(S)-(-)-Nicoumalone; (S)-(-)-Acenocoumarol
NSC-250682Oridonin
(±)7-HDoHE (250 ug)(±)7-hydroxy-4Z,8E,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenoic acid; 7-hydroxy Docosahexaenoic Acid; (±)7-HDoHE
Prednisolone Phosphate (sodium salt) (1 g)Disodium Prednisolone 21-Phosphate; 11β,17-dihydroxy-21-(phosphonooxy)-pregna-1,4-diene-3,20-dione, disodium salt
UR- N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5 (500 ug)[1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl](2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)-methanone-2,4,5,6,7-d5; XLR11 N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5; UR- N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5
ADBICA N-pentanoic acid metabolite (1 mg)5-(3-((1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)carbamoyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid; ADBICA N-pentanoic acid metabolite
(+)-Aphidicolin (5 mg)(3R,4R,4aR,6aS,8R,9R,11aS,11bS)-tetradecahydro-3,9-dihydroxy-4,11b-dimethyl-8,11a-methano-11aH-cyclohepta[a]naphthalene-4,9-dimethanol; ICI 69653|NSC 234714; (+)-Aphidicolin
2C-N (exempt preparation) (1 mg)2,5-Dimethoxy-4-nitrophenethylamine; 2,5-dimethoxy-4-nitro-benzeneethanamine
3-(5’-Hydroxymethyl-2’-furyl)-1-benzylindazoleYC-1
4-[(Aminoiminomethyl)amino]benzoic acid 6-(aminoiminomethyl)-2-naphthalenyl ester dimethanesulfonate; FUT-175; FuthanNafamostat Mesylate
HPGDS Inhibitor I (5 mg)6-(3-fluorophenyl)-N-[1-(2,2,2-trifluoroethyl)-4-pipeidinyl]-3-pyridinecarboxamide
20-trifluoro Leukotriene B4 (25 ug)5S,12R-dihydroxy-20,20,20-trifluoro-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraenoic acid; 20-trifluoro LTB4; 20-trifluoro Leukotriene B4
病毒性神经坏死病病毒PCR检测试剂盒说明书兔抗GRIA4多克隆抗体 英文名:Anti-GRIA4 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗TNIP3多克隆抗体 英文名:Anti-TNIP3 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ASH2L多克隆抗体 英文名:Anti-ASH2L rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗TAB1多克隆抗体 英文名:Anti-TAB1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗GINS1多克隆抗体 英文名:Anti-GINS1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗RUNX1(Phospho-Ser276) 多克隆抗体 英文名:Anti-RUNX1(Phospho-Ser276) rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃)
兔抗CYP19A1多克隆抗体 英文名:Anti-CYP19A1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
Anti-CHURC1 rabbit polyclonal antiboy 英文名:Anti-CHURC1 rabbit
兔抗MAP3K14多克隆抗体 英文名:Anti-MAP3K14 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗HS7B12多克隆抗体 英文名:Anti-HS7B12 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ABCC1多克隆抗体 英文名:Anti-ABCC1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
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