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- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0608
- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Column Sephadex Probe Purification Kit
- 库存：
890
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是基于分子排阻层析原理的、专门用于纯化同位素和非同位素标记的核酸探针的试剂盒。在分子排阻层析过程中，大分子（标记的核酸探针或Oligo探针）将绕过层析介质，快速穿透出层析柱，小分子（未参入的核苷酸）将进入层析介质中，缓慢穿透出层析柱。根据这一时间差而将两者分开。此过程的示意图如下：
柱式探针纯化试剂盒本产品具有下列特点：
1.即开即用，提供纯化所需要的所有溶液和介质，不需要单独准备每种试剂，免去用户自己摸索条件。
2.适用于PCR标记、随机引物标记、切口平移和填入法标记。
3.能去掉绝大部分的未标记物、盐离子等小分子。
4.足够10次纯化使用，每次可以纯化50uL的标记反应液。
5.可用于DIG、生物素、Cy3、Cy5等非同位素标记的DNA和RNA探针（由于标记分子带非极性基团，容易进入有机相，因此这些探针不能用传统的酚氯仿抽提-乙醇沉淀法纯化）。
柱式探针纯化试剂盒运输及保存：
常温运输及保存，有效期一年。
自备试剂：自备标记探针
柱式探针纯化试剂盒使用方法
注意：由于非同位素标记的探针浓度一般都比较低，非常容易吸附到枪头或离心管的表面，造成探针的损失，因此最好使用硅化的离心管和枪头。
1.摇晃SephadexG50介质至均匀，迅速转移0.5mL到离心柱中，套上套管（又叫收集管）。
2.2000rpm室温离心1分钟，SephadexG50介质将压紧在柱子里面。
3.倒掉套管中的穿透液，再加0.5mL的摇晃后得到的SephadexG50介质，2000rpm室温离心1分钟。
4.经上述步骤会得到体积约为0.5mL压紧后的SephadexG50介质。如不足，再加入少量的G50介质离心，直到体积达到0.5mL左右。倒掉套管中的穿透液。
5.在柱子中SephadexG50界面的上面加入50uLTE缓冲液，套上套管，2000rpm室温离心1分钟，测量收集管中穿透液的体积。
6.重复上步3-5次，直到收集管中穿透液的体积跟加入的体积一样（50uL）。
7.将50uL的标记探针（必须使用50uL样品。如果没有50uL，需要用TE缓冲液或水补足到50uL）加到柱子中SephadexG50界面的上面，套上一个自备的（最好是硅化的）离心管。
8.2000rpm室温离心1分钟，离心管中的穿透液将含标记探针，未参入的标记物将滞留在介质中。
9.电泳或点杂交检测探针回收效率后直接使用或放-20℃长期保存。
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