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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Magic Solution DNA BACK
- 库存:
870
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是xuanya独创的一管式非醇DNA/RNA沉淀剂,其主要特点超快速度,是只需要离心2分钟即可快速沉淀回收溶液中的单双链DNA或RNA(包括探针),可广泛用于DNA/RNA的去盐,去蛋白,反应纯化,浓缩等。与经典方法比较如下:

超快非醇核酸沉淀剂运输及保存:
常温运输和保存,有效期一年。溶液A呈红色,如果颜色发生变化,则表示pH已经改变,请弃之不用。溶液B为无色液体,会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀,用前无需溶化,直接取上清液使用)。
自备试剂:TE或无菌水
超快非醇核酸沉淀剂使用方法
1.将1/10体积的核酸沉淀液加入到DNA溶液中(包括PCR,酶切反应液等),振荡混匀。如果回收20Kb以上的DNA片段,混匀时需要温和;对20Kb以下的DNA片段,可以剧烈震荡。
2.室温静置至少2分钟。此步十分关键,不能省略而直接离心。
3.13000g室温离心5分钟后,小心吸弃上清。
4.加入0.8mL核酸沉淀洗涤液,充分震荡混匀。
5.13000g室温离心2分钟,小心吸弃上清。
6.再用0.2mL核酸沉淀洗涤液,充分震荡混匀。
7.13000g室温离心2分钟,小心吸弃上清。
8.沉淀即为纯化的DNA片段,加入少量TE或水,充分吹打溶解。如果最后还会有少量白色不溶沉淀,属于正常现象。


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文献和实验细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中PH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械切力作用降解。EDTA的作用:(1)螯合Mg2+ 、Ca2+ 等金属离子,抑制脱氧核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时一定的金属离子作辅基)。(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。2.溶液Ⅱ--NaOH-SDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pHSDS
上的电荷,减少相斥力而互相聚合,后者是因为钠盐与SDS-蛋白复合物作用后,能形成较小的钠盐形式复合物,使沉淀更完全。 4.为什么用无水乙醇沉淀DNA? 用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相
(酶抑制物残留) 要求很高。 4:彻底匀浆是提高得率和降低降解的关键。 5:检查 RNA 的完整性电泳检测,28S:18S =2:1 是完整的标志,1:1 对大部分实验也是可以接受的。 6:去除 DNA用于 RT-PCR, array analysis 最好用 Dnase I 去除 DNA。 7:降低外源酶的污染 – 不能从外面又导入酶。 8:低浓度的核酸浓缩时,要加入助沉淀试剂。但要防止助沉淀剂含酶及 DNA 污染。 9:彻底溶解 RNA,必要时可以 65C 加热
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