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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
DNA meter
- 库存:
870
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
DNA电泳分子量标准(3)pUC19/MspI产品及特点:
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5 uL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

DNA电泳分子量标准(3)pUC19/MspI运输及保存:
低温运输、-20° C保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5 uL。

DNA电泳分子量标准(3)pUC19/MspI疑难解答
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。

DNA电泳分子量标准(3)pUC19/MspI相关资料
琼脂糖凝胶形成的分子机制
Agarose(琼脂糖)是从Agar(琼脂,海藻细胞壁的成分)中纯化出来的非离子型的、主链由agarobiose(琼脂二糖)聚合而成的一种线性多糖,平均分子量为12000。琼脂二糖由1,3连接的β-D-galactopyranoseD-galactose(β-D吡喃半乳糖)和1,3连接的3,6-anhydro-a-L-galactopyranose(3,6脱水L-吡喃半乳糖)以1,3--β糖苷键连接而成双糖聚合物。琼脂糖加热溶解后在水溶液中是以randomcoil的状态存在。随着温度降低到45℃左右,两条琼脂糖聚糖链互相形成双螺旋。随着温度的继续降低,琼脂糖双螺旋相互以氢键交联再聚合成束,形成网络系统。由于琼脂糖不含有带电荷的基团,而且不吸附被分离的物质,很容易制备,故成为核酸电泳必不可少的工具。
DNA电泳分子量标准(3)pUC19/MspI相关产品:
| T4 RNA 连接酶 2( 截短型 ) |
| T4 RNA 连接酶 2( 截短型 K227Q) |
| 核酸酶 |
| ATP 依赖的 DNase |
| DNase I 干粉 |
| DNase I 溶液 |
| RNase A 干粉 |
| RNase A 干粉 |
| RNase A 溶液,10mg/mL |
| RNase A 溶液,2mg/mL |
| DNA电泳分子量标准(3)pUC19/MspIBAL31 核酸酶 |
| Benzonase 核酸酶 |
| 冷启动核酸酶 |
| S1 核酸酶 |
| 绿豆核酸酶 |
| 微球菌核酸酶 |
| 限制性内切酶 |
| ApaI |
| BamHI |
| BglII |
| DpnI |
| EcoRI |
| EcoRV |
| HindIII |
| HinfI |
| KpnI |
| Mlu |
| MboI |
| NcoI |
| NdeI |
| NotI |
| PstI |
| PvuII |
| RsaI |
| SacI |
| SalI |
| SmaI |
| DNA电泳分子量标准(3)pUC19/MspIXbaI |
| XhoI |
| 核酸酶 |
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文献和实验原理】 1.DNA片段回收方法:DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中,通上一定电压进行电泳,不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶,用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2.利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3’T突出端的载体,在连接酶作用下,可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点,可用于PCR产物的克隆和测序。
/μg pUC19),这样才可能得到比较理想的阳性克隆。 9.试剂盒配有Control DNA。通过对照实验判断试剂盒的保存效果。 【实验安排】 第一天下午:配制6×电泳加样缓冲液、TAE等缓冲液,将各种耗材灭菌。 第二天上午:制备琼脂糖凝(1%),电泳检测,切胶回收DNA片段 第二天下午:大肠杆菌制备感受态细胞;DNA与T载体连接转化大肠杆菌。 第三天上午:观察转化结果(蓝白斑情况),计算重组率。 【实验报告要求与思考题】
EcoRⅠ或HindⅢ酶解所得的λDNA 片段来作为电泳时的分子量标准。λDNA 为长度约50kb的双链DNA 分子,其商品溶液浓度为0.5mg/ml,酶解反应操作如上述。HindIII 切割DNA 后得到8 个片段,长度分别为23.1, 9.4, 6.6, 4.4, 2.3, 2.0, 0.56 和0.12kb。EcoRI 切割lDNA 后得到6 个片段,长度分别为21.2, 7.4, 5.8, 5.6, 4.9 和2.5kb。 三、琼脂糖凝胶的制备 1、取5×TBE 缓冲液20
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