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NGS Fast DNA Library Prep Set for Ion Torrent
长期
北京百奥莱博科技有限公司
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24次|96次
特别提示:包括二代测序DNA快速建库试剂盒(Ion Torrent平台)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
组份 | 24次 | 96次 |
10×End Repair Buffer | 200μl | 800μl |
End Repair Enzyme Mix | 48μl | 192μl |
Ligation and Nick Repair Buffer | 400μl | 2×800μl |
T4 DNA Ligase | 48μl | 192μl |
Bst DNA Polymerase | 48μl | 192μl |
2×HiFidelity PCR Mix | 600μl | 2×1.2ml |
10×Primer Mix(5μM each) | 150μl | 600μl |
试剂 | 体积 |
10×End Repair Buffer | 6μl |
End Repair Enzyme Mix | 2μl |
fragmented DNA | X(10ng~1μg) |
RNase-Free Water | Up to 60μl |
试剂 | 体积 |
Ligation and Nick Repair Buffer | 10μl |
T4 DNA Ligase | 2μl |
Bst DNA Polymerase | 2μl |
Adaptor A | 7μl |
Adaptor P1 | 7μl |
RNase-Free Water | 12μl |
Total volume | 40μl |
插入DNA 量/反应 | 不同大小DNA 建议Adaptor 使用浓度 | |||
130 bp | 260 bp | 320 bp | 410 bp | |
1μg | 10μM | 10μM | 5μM | 5μM |
500ng | 5μM | 5μM | 2.5μM | 2.5μM |
100ng | 1μM | 1μM | 0.5μM | 0.5μM |
试剂 | 体积 |
连接adaptor后的DNA片段 | 20μl |
2×HiFidelity PCR Mix | 25μl |
10×Primer Mix(5μM each) | 5μl |
总体积 | 50μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 98℃ | 30s | |
变性 | 98℃ | 10s | 4~12个循环 |
退火 | 65℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 30 s | |
终延伸 | 72℃ | 5min |
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