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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Herbal DNAout
- 库存:
860
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA的完整性;处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题,xuanya在植物DNAOUT产品基础上开发了本产品。其特点如下:
1.适合于大多数药材。
2.得到的DNA纯净,OD260/280一般都在1.6以上,原液或100倍之内的稀释液一般都能直接作为PCR模板。
3.操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。
4.试剂无毒无害,环保卫生。

中草药DNAout运输及保存:
常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂:氯仿、、75%乙醇
中草药DNAout使用方法
1.65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL加入到10-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。
2.称取20mg左右的中草药,先剪成或研磨成微小的碎片,然后转移到预热的溶液A中匀浆,匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨后将中草药粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨,因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。
3.将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,然后全部转移到新的1.5mL塑料离心管中(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,植物碎片可倒入)。
4.12000-15000g室温离心3分钟,将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中(上清液的体积一般为200-700µL,如果体积超过700µL,多余部分可以不要)。有的上清液中会有少量细小块状物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀(溶液将呈白色混浊状),然后置冰浴中5分钟。
6.12000-15000g室温离心3分钟,转移上清到新离心管中。
7.加入0.2mL的氯仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。
8.12000-15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。
9.重复氯仿抽提步骤一次,此步可以有效去除含色素物质。
10.加入0.6-1倍体积的(自备),上下颠倒30秒混匀。
11.12000-15000g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。
12.沉淀用75%乙醇清洗2次后,室温晾干。
13.加入50-100µL自备缓冲液(如TE)溶解沉淀。DNA即可用于电泳,酶切和PCR等反应。如果需要测OD,则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。
中草药DNAout注意:用本产品提供的RNase处理DNA样品时,做好按《分子克隆手册》等参考书上的方法彻底去除其中的DNase。
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