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- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0366
- 2025年12月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Bacterial Endotoxin Erasol
- 库存：
860
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
内毒素(即lipopolysaccharides，LPS)是E.coli细胞壁的主要成分，传统的去除内毒素的方法是将内毒素和DNA一起纯化出来，然后再用各种方法去除其中的内毒素，操作繁琐，DNA回收率低。本产品可以直接把E.coli表面的内毒素去除，从根本上避免了内毒素对后续操作（如质粒DNA提取，重组蛋白质提取）污染。本产品具有下列特点：
1.在菌体收集阶段去除内毒素的产品，从源头上避免了内毒素跟DNA和胞浆蛋白的接触，从根本上防止了可能产生的污染。
2.操作简单快速，用酶溶液温和清洗菌体3-4次即可去掉细菌表面的内毒素，只需要10分钟左右时间，不需要复杂仪器设备。
3.高效，能去除99%以上的内毒素。
4.跟各种质粒DNA提取、基因组DNA提取和蛋白质提取等操作兼容，DNA丢失率只有10%左右（其他方法DNA丢失率可以高达50%）。
5.不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
6.既可小规模使用(在1.5mL离心管内)，也可放量用于大规模无内毒素质粒DNA提取和无内毒素蛋白质纯化。
菌体内毒素清除剂运输及保存：
常温运输和保存，有效期一年。
自备试剂：无
菌体内毒素清除剂使用方法
一：用于菌液小于3mL的样品
1.收集1.5-3mLE.coli饱和菌液，12,000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2.加入1mL本产品温和混匀后10,000-12,000rpm离心1分钟，弃上清（含内毒素）。
3.再重复上述操作3-4次，得到的菌体可以直接进入后续的无内毒素质粒DNA提取或无内毒素蛋白质提取程序。二：用于菌液多于3mL的样品整个操作同上，只是在15或50mL塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力，本产品的用量按比例增加。
菌体内毒素清除剂常见问题
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同，所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附，离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子（类似于细胞膜的磷脂分子），能够形成大小不等的聚合物，跟质粒DNA和蛋白质大小接近，所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。
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文献和实验关键词： 鼠抗内毒素单链噬菌体抗体 制备 近几十年来，G-菌的感染一直是困扰临床的一个主要难题。以前统计，美国每年有约40万的脓毒症患者，并发休克患者的死亡率高于50%。内毒素(LPS)作为G-菌的毒性成分，在启动体内免疫系统反应、介导炎性介质因子的释放、导致脓毒症和中毒性休克中起着重要的作用。因此我们旨在制备出一株对内毒素具有较高亲和力的单链抗体。首先用内毒素腹腔注射免疫雌性BALB/c小鼠共4周，从小鼠脾脏中提取总RNA，然后反转录合成cDNA第一链。利用RT
的膜，在质粒抽提过程中，使质粒能在离心过柱的瞬间，充分结合到质粒纯化柱，并在一定条件下被充分洗脱，从而实现质粒的快速抽提纯化。同时，试剂盒中配套的内毒素清除剂可特异性溶解内毒素并与水相分离，纯化的质粒内毒素 在质粒提取过程中，未提出质粒或质粒得率低有哪些原因呢？ 1）细菌老化：请凃布平板培养后，重新挑选新菌落进行液体培养； 2）细菌培养物生长过度或不新鲜：不要于37℃培养超过16小时，分离质粒前长时间存放培养物是不利的. 3）质粒拷贝数低：由于使用低拷贝数载体引起的质粒
内毒素存在于菌体内，是菌体的结构成份。细菌在生活状态时不释放出来，只有当菌体自溶或用人工方法使细菌裂解后才释放，故称内毒素。大多数革兰氏阴性都有内毒素，如沙门氏菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、奈瑟氏球菌等。 内毒素是磷脂一多糖一蛋白质（phospholid-polysaccharide-protein）复合物，主要成份为脂多糖(lipopolysaccharide,lps)。是细胞壁的最外层成分，覆盖在坚韧细胞壁的粘肽上。各种细菌内毒素的成份基本相同，都是
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