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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
52
- 英文名:
Influenza Virus AH7N2RTPCR
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
1.甲型流感病毒72亚型PCR检测试剂盒说明书仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
| 产品名称 | 甲型流感病毒72亚型PCR检测试剂盒说明书 |
| 英文名称 | Influenza Virus AH7N2RTPCR |
| 编号 | CP913114 |
特点:
1.甲型流感病毒72亚型PCR检测试剂盒说明书即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素:
甲型流感病毒72亚型PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
丹酚酸B;丹参酚酸B CAS 115939-25-8 订购|咨询 规格:HPLC≥98%,20mg/支
苍术(北苍术) CAS 订购|咨询 规格:0.5g
二甲氧苄啶 对照品 CAS 订购|咨询 规格:200mg
南 标准品 CAS 订购|咨询 规格:200mg
肠道病71型IgM抗体国家参考品 CAS 订购|咨询 规格:27支/套
植酸钠;Sodium phytate CAS 14306-25-3 订购|咨询 规格:25mg
异莨菪亭;Isoscopoletin CAS 776-86-3 订购|咨询 规格:10mg
异荭草素; Homoorientin CAS 4261-42-1 订购|咨询 规格:20mg
洋川芎内酯H;Senkyulide CAS 94596-27-7 订购|咨询 规格:50mg
23-乙酰泽泻醇B;Alisol B 2 CAS 19865-76-0 订购|咨询 规格:20mg
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使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1.甲型流感病毒72亚型PCR检测试剂盒说明书 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
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文献和实验与SafetyTector™ S孵育后,均不再检测到感染性。 分析性能评价 除了对使用者安全之外,强大的分析性能对诊断试剂盒的开发和验证也是必不可少的。选择合适的稀释液对性能至关重要。分析潜在感染样本的一个挑战是如何产生病毒灭活效果但不干扰抗原-抗体相互作用而导致错误结果。CANDOR 在开发区SafetyTector™ S的过程中实现了这种平衡。在德国联邦药物和医疗器械研究所(BfArM)列出的市售快速抗原测试中,通过用SafetyTector™ S替换各自提供的稀释和提取缓冲液来研究分析性能。在这些不同
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
%;2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA(按照基因组 DNA 提取试剂盒的说明书操作);3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增,这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase,一切按照该酶的说明书严格操作;4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂盒回收 DNA 条带,一切按照胶回收试剂盒说明书进行操作;5. 回收后的 DNA 样本,经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA,部分结果如下:T7 EI验证成功,开始正式实验时间飞逝,上次说
,支原体DNA会显示为特异性条带,以此指示支原体的存在。PCR法可以检测大多数支原体,但谨慎起见最好同时使用另一种检测方法来进行验证。 普健生物生产的支原体PCR检测试剂盒(Mycoplasma PCR Test Kit)是一款具有快速、灵敏、特异性高等特点的支原体检测试剂盒,可用于细胞、培养基、动物血清等的支原体检测。本产品通过聚合酶链式反应技术(PCR)特异扩增支原体16s-rRNA 基因保守区域片段进行支原体检测,能够检测包括M. arthritidis, M
技术资料暂无技术资料 索取技术资料








