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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
37
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海谷研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50管/24样
规格:50管/48样
测试方法:高效液相色谱法
特点:
1、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)测试盒50管/24样品牌优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
操作流程:
1.N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)测试盒50管/24样品牌从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
注意事项:
①N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)测试盒50管/24样品牌加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
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文献和实验数来自血液。大多数分子量70kDa,正常时不能从肾小球滤过,当滤过功能正常时尿酶增加主要反映肾小管间质损害,常作为监测药物肾毒性(氨基糖苷类抗菌素、抗肿瘤药物及锂制剂等)、肾移植排异反应以及各种肾小管间质疾病诊断的指标。近年发现,在中草药肾病患者中,当肾功能中度受累时,尿中神经内肽酶(NEP)浓度明显下降,至终末期肾衰时几乎为零。NEP浓度与尿中微量蛋白呈负相关,与肌酐清除率则呈正相关。 而来自肾实质本身的尿酶也是帮助定位诊断肾脏(尤其肾小管)损害的良好标记性物质。如N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷
、溶酶体与疾病 各类贮积症 台-萨氏综合征(Tay-Sachs diesease):溶酶体缺少氨基已糖酯酶A,导致神经节甘脂GM2积累。 II型糖原累积病(Pompe病):缺乏α-1,4-葡萄糖苷酶,糖原在溶酶体中积累。 Gaucher病:缺乏β- 葡萄糖苷酶,葡糖脑苷脂沉积。 细胞内含物病(inclusion-cell disease):N-乙酰葡糖胺磷酸转移酶单基因突变。高尔基体中加工的溶酶体前酶上不能形成M6P分选信号,病人成纤维细胞的溶酶体中没有水解酶,底物在溶酶体中贮积,形成
。运动后尿中排出量可增加,尿液检测时应在安静状态为宜。 ㈤尿N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶测定 N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase, NAG)是广泛分布于各种组织中的溶酶体酶,分子量为140KD,在肾皮质含量最高,髓质次之。NAG在近曲小管上皮细胞内含量最丰富,远远高于输尿管和下尿道。由于溶酶体对各种毒素、化学物质、自由基和免疫反应敏感,即使在肾小管轻微损伤时,尿NAG活性也会增高。因此,测定尿中NAG活性对对早期发现肾毒性损伤
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