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- xuanya
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- XY-TE-0210
- 2025年10月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
White Cell Lysis Solution
- 库存：
860
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品为即用型白细胞裂解溶液，可以用于裂解分离纯化好的血液白细胞， 用于DNA提取、RNA提取等后续实验。
白细胞裂解液运输及保存：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：Tris 饱和酚、氯仿、乙酸钠溶液、乙醇、TE 缓冲液等
白细胞裂解液使用方法
下面以 DNA 提取为例：
1. 取新鲜抗凝血 5 mL，在 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中用红细胞裂解液裂 解红细胞（红细胞裂解液有几种配方，用户需要根据所选产品的使用手册进 行操作，这里不列出每种的详细步骤），也可以直接 2500 rpm 离心 5 分钟后 取白细胞层到一新的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中。
2. 在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞 的终体积为 2 mL。
3. 加 1 mL 的本产品，混匀后 55℃ 保温 3 小时，其间轻轻振摇数次。
4. 加入 3 mL 自备的 Tris 饱和酚，轻轻震摇 5 分钟，使得水相和酚相充分分开。
5. 3500 rpm 离心 15 分钟，上层水相含 DNA，中间白色层为蛋白质，下层为 酚相。
6. 将非常粘稠的含 DNA 的上清液转移到一干净的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心 管中。
7. 再用 Tris 饱和酚重复上面的抽提步骤，直到离心后中间层没有白色的蛋白出 现为止。
8. 在上清液中加入等体积的自备的氯仿，轻轻震摇 5 分钟，3500 rpm 离心 5 分钟，转移上清液到一干净的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中。此步可以 除去残留的酚。
9. 在上清液中加入 0.1 倍体积的自备的 3 M 乙酸钠溶液（pH 5.2）和 2 倍体 积的无水乙醇，轻柔颠倒混匀，将出现絮状的 DNA 沉淀。
10. 用移液枪头将 DNA 沉淀挑取出来，转移到 1.5 mL 的塑料离心管中，用 75% 的乙醇浸泡 2 次。此操作可以去除 DNA 中残留的盐离子。
11. 转移 DNA 沉淀到一个 1.5 mL 的塑料离心管中，空气中放置 10 分钟左右待 乙醇挥发后，加入 0.5 mL 自备的 TE 缓冲液溶解 DNA，4℃放置待用。
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文献和实验师赠王老吉 在提取血中DNA时，细胞裂解液是指？平常的细胞裂解液，还是白细胞或者红细胞的裂解液？ liushan8_9 白细胞或者红细胞的细胞膜应该是一样的吧。 yyf87255300 在提取外周血DNA时，成熟的红细胞内没有核，所以裂解的外周血的白细胞，我们实验室用的裂解液是三蒸水 zjubell 师赠王老吉 wrote:
1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor(sigma cat no P8340) and 10μl phosphatase inhibitorRIPA buffer 最终浓度1M Tris-HCl pH7.5) 5 ml 50mMNaCl 0.87g 0.15 MNa-deoxycholale 0.1g （1%）0.5M EDTA(pH8.0) 0.8mlNaF 41 mgNonidet P40 1 ml （1%）Aprotinin
/ml 牛胰蛋白酶抑制剂 （ aprotinin ），1μg/ml亮抑蛋白酶肽 （ leupeptin ）裂解液缓冲液：10mM Tris-HCl（pH7.4），0.15M NaCl，5mM EDTA（pH8.0），1%Triton×100；使用前加5mM DTT，0.1mM PMSF异丙醇和5mM ε-氨基己酸。2. 裂解液的制备A. 制备细胞裂解液：①收集胰蛋白酶消化的细胞并离心，用PBS清洗。②用100μl RIPA缓冲液冰浴溶解沉淀10min（每500000个细胞20μl RIPA缓冲
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