红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer) C1311
描述:我们提供的红细胞裂解液可直接与血液或脾细胞悬液混合,也可用于重悬离心收集的血细胞,
其能够选择性裂解样品中的红细胞,而不破坏白细胞。通过低速离心的方法去除红细胞裂解碎片和
血小板,收集白细胞,回收率可达 90%以上。被富集的白细胞的生物学活性不受影响,可用于各种
后续的细胞实验。当从得到的白细胞中提取 DNA、RNA、和蛋白质时,可免除红细胞成分如血红
素等的不利影响。适于裂解人全血、小鼠全血或脾细胞悬液中的红细胞。
规格:100 ml
储存: 4ºC, 24 个月
与全血混合直接裂解红细胞:
1.
采取0.35 ml人或小鼠全血,加入1.5 ml离心管
2.
加1 ml红细胞裂解液,颠倒混合,室温放置10 min。
3.
1500g离心5分钟,弃上清。细胞沉淀应为白色。如果裂解不完全,可用1 ml裂解液重悬细胞沉
淀,室温静置10 min。1500g离心5分钟,弃上清。
4.
用1.5 ml PBS缓冲液或生理盐水重悬细胞,1500g离心5分钟,弃上清。重复洗涤2次。
重悬细胞沉淀后裂解红细胞:
1.
采取1 ml人全血或小鼠全血,枸橼酸钠或EDTA或肝素抗凝。或用1个小鼠脾脏制备的细胞悬液,
1500g离心10分钟收集所有细胞。弃上清。
2.
加3 ml 裂解液重悬细胞(约100~200万个细胞)。颠倒混合,室温放置10 min。
3.
1500g离心5分钟,弃上清。细胞沉淀应为白色。如果裂解不完全,应重复步骤2-3
4.
用1.5 ml PBS或生理盐水重悬细胞,1500g离心5分钟,弃上清。重复洗涤2次。
说明:
1.
每3 ml裂解液可充分裂解约1 ml的全血中的红细胞,可按此比例扩大或缩小规模。加入过少的
裂解液可能导致红细胞裂解不完全。
2.
该裂解液裂解人和小鼠红细胞效果佳,裂解其他动物红细胞时效率略低但仍可裂解。
3.