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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
RNA extraction related products
- 库存:
860
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
TRIzol是美国Invitrogen公司的、用于总RNA提取(主要是动物总RNA 提取)的著名产品,具有广大的客户群。但其缺点之一是一直没有柱式升级产品,客户仍然要使用既繁琐又费事的非柱式操作(另一缺点是不能用于富含多糖和多酚的材料)为解决此问题,我们特推出本产品,主要特点是:跟TRIzol结合使用,把经典操作变成了柱式操作,简化了实验流程,用户可以节约30分钟的时间。其他特点如下:
1. RNA质量更好,因为操作简短减少了RNA在提取过程中的降解。
2. RNA纯度更高,OD260/OD280一般在1.9以上,比经典TRIzol法得到的更纯。
3. 专门的洗涤条件能有效去除基因组DNA,进一步减少其对RNA的污染。
4. 适 用于 其 他基 于 酸酚 /异酸胍提取原理的RNA提取产品,包括TRIzol、TRIzol LS、TRI Reagent等。
5. 可以省略氯仿处理步骤,避免接触有毒试剂。

RNA提取相关产品运输及保存:
常温运输和保存, 有效期一年。
自备试剂:TRIzol 或 TRIzol 同类产品、 氯仿
RNA提取相关产品使用方法
一、 免氯仿操作(此操作更快捷, 不需要氯仿, 但纯度稍低)
1. 按 TRIzol 的使用手册进行总 RNA 提取到加氯仿之前一步。
2. 将裂解物在 13000rpm 离心 2 分钟(最好 4℃离心, 常温离心也可) ,沉淀是不能裂解的细胞碎片和结缔组织纤维。
3. 转移上清液(约 1mL) 到至一个自备的 RNase-free 2 mL 塑料离心管中(注意, 不是 1.5mL) 。
4. 加入等体积的柱式动物 RNAout 溶液 B, 颠倒混匀 30 秒。
5. 分次转移到离心吸附柱中, 每次约 0.7mL。
6. 每次转移后, 需要 13000-15000 g 室温离心半分钟, 弃收集管中的穿透液。 如果不能全部离心下去, 可延长离心时间到 2 分钟。 是否需要延长根据样品不同而不同。
7. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中, 室温 13000rpm 离心半分钟,弃收集管中的穿透液。 一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 再用 0.3 mL 通用洗柱液重复上步一次。
9. 室温 13000rpm 干甩半分钟。 此步对去除残留通用洗柱液十分重要, 否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的质量和使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的 RNase-free 1.5mL 离心管中, 加入50-100 μL RNA 洗脱液。
11. 室温 13000rpm 离心半分钟, 离心管中溶液即为 RNA 样品, 可以立即使用或存放于-80℃待用。
二、 加氯仿操作(此操作需要氯仿, 但纯度稍高)
12. 按 TRIzol 的使用手册进行总 RNA 提取加入氯仿离心后这一步。
13. 离心后, 将上清转移到(约 0.7mL) 到至一个自备的 RNase-free 1.5-2mL 塑料离心管中。
14. 后续操作同第 4-11 步
RNA提取相关产品疑难解答
Q: 上样孔里的红色荧光物一定是 DNA 污染吗?
A: 不是。 用 TAE 或 TBE 电泳液和非变性胶电泳 RNA 时容易产生此现象,天泽基因初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链 RNA 通过碱基互补或通过络合(如果使用 TBE 作电泳液的话) 形成的复合物,加 RNase 处理后, 这些红色荧光物(RNA) 一般会消失。 为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和 RNA 专用上样液(如天泽基因的RNAon) 。
RNA提取相关产品Q: 如何确认和去处除污染的基因组 DNA?
A: 如果怀疑有 DNA 污染, 可以用 RNase 处理 RNA 样品, 然后再电泳。 如果上样孔里的红色荧光物不消失, 则表示是基因组 DNA 污染。 进一步确认可以使用 PCR 扩增法。 去除污染的 DNA 可以使用天泽基因的非酶的DNA 去除剂 DNA Erasol 或 RNase-free DNase, 由于 RNase-freeDNase 一般都有残留的 RNase 污染, 所以必须严格按照厂家提供的手册进行操作。
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