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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Column DNA Erasol
- 库存:
860
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染, 这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。本产品是的非酶DNA清除剂-2的柱式升级产品,可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。 目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。xuanya开发的柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有比非酶DNA清除剂-2操作上更快速的特点。
1. 操作更加简单快速,全部操作只需要几分钟。
2. 回收率高达 80%以上。
3. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平, 而RNA分子完整性不受任何影响。
4. 本身不含RNase污染。
5. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
6. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。

大提柱式DNA清除剂运输及保存:
常温运输和保存
大提柱式DNA清除剂使用方法
1. 将 50 ul 总 RNA 溶液与溶液 A 按 1: 1 的比例混合,充分震荡半分钟。
注意:
RNA 溶液中盐(如钠离子)的浓度不能高于 0.2 M,如果 RNA 溶液的量不足50 uL,最好加无 RNase 水补足到 50 uL 以便后续操作。
2. 加入相当于 RNA 溶液和溶液 A 混合液总体积 9 倍体积的溶液 B,颠倒数次充分混匀。 注意: 溶解溶液 B 沉淀。溶液 B 在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将混合液转移到离心吸附柱(60911D)中,室温 12000 rpm 离心半分钟, 弃穿透液。
4. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中, 12000 rpm 室温离心半分钟, 弃穿透液。
5. 一次洗涤一般足够去除杂质。 如果有必要,可以再加 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中, 12000 rpm 室温离心半分钟并弃穿透液。一般情况,此步可以省略。
6. 加 0.7 mL 溶液 C 到离心吸附柱中, 12000 rpm 室温离心半分钟,弃穿透。
7. 室温 12000 rpm 离心半分钟。此步十分重要,否则会影响 RNA 的使用。
8. 将离心吸附柱转移到一个新的 1.5 mL 离心管中,加入 30-50 uL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。 室温 12000 rpm 离心半分钟, 离心管中溶液即为RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
大提柱式DNA清除剂疑难解答
Q:能否用本产品对同一样品进行反复处理?
A:可以。
大提柱式DNA清除剂Q: 本产品跟 DNA Erasol-2有何区别?
A: 本产品为柱式升级产品,比 DNA Erasol-2 更快速清除RNA样品中的DNA污染
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文献和实验。 5. 粘稠的样品通常无法获得好结果 蛋白丢失:粘稠物包裹蛋白导致无法释放,样品很难跑出理想的结果,有时甚至是完全没有条带。 令人反感的粘稠「鼻涕」是怎么形成的? 问题出在细胞裂解过程中,细胞中的 DNA 缠绕其他大分子物质,导致蛋白质聚集,再加上其他细胞碎片(如油脂、难溶蛋白等)共同形成粘稠的「鼻涕」状态,也被称为「核酸残团」。 核酸残团的存在大大降低了蛋白的提取效率,使得蛋白丢失,从而导致了 WB 实验中的一系列问题。曾有研究者用不同方法进行小鼠脾脏和肝
,即切胶的那次电泳中,如果切成的条带很清晰,不拖泥带水,没有弥散,没有拖尾,那做回收、连接效果最好。相反,若有弥散、拖尾、不清楚、一团亮等情况就是切的不好,做后续实验成功率会降低。若真是效果很差建议改进体系重新切。 回收 回收可以用柱式试剂盒或手工法。柱式回收试剂盒:此类试剂盒适合各种长度 DNA,对黏性末端基本没有破坏,回收效率也不错。手工醇沉淀法步骤如下,把切得的胶弄碎,用 Tris-HCl 浸泡一段时间,吸出所有的液体,用酚抽提一遍,氯仿抽提一遍,加盐和醇醇沉,沉淀
是柱式分离,如RNApure 因为操作简单,时间短,纯度高而受到大家的喜爱,RNApure不需要DNA酶消化DNA,节省了时间,避免RNA的降解,从而提高了产量;相对非柱式分离(如TRIZOL),去除蛋白及其他杂质干净,提高了纯度,对于细胞、组织、一般植物均非常适合。植物RNA的提取比较难抉择,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白杂质、次生代谢物含量的影响,一般用TRIZOL提取纯度不高,而且很多植物用TRIZOL提取不出来。这时候可以选择多糖多酚植物总RNA提取试剂盒(水仙、辣椒、胡萝卜、玉米、百合
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