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文献和实验缓冲液: Na2H2PO4 6.9克 溶于40DW中,用5NNOH调PH7.0,再加水到50毫升,冰箱保存.用前若有结晶可稍加温,溶解后再用. ONPG液: 称取ONPG(邻硝基酚--B--D半乳糖苷)80毫克,溶于15毫升D.W中,再加上缓冲液5毫升,放入冰箱中保存.此液不稳定,如出现黄色即不能用. 鉴别: 脑膜炎球菌和乳糖球菌及沙门氏菌属与枸橼酸菌属及亚利桑那氏菌属. 脑膜炎球菌和沙门氏菌属为阳性. 乳球菌,枸橼酸菌属和亚利桑那菌属为阳性.
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
-1-磷酸在己糖 -1-磷酸尿苷酸转移酶( hexose- 1- phosphate uridy- lyl transferase, EC 2. 7. 7. 12)的催化下与 UDP葡萄糖起反应,变成 UDP半乳糖和葡萄糖 -1-磷酸,与葡萄糖代谢途径汇合。也有的细胞具有从半乳糖 -1-磷酸与 UTP形成 UDP半乳糖的另一途径。动物从肠壁吸收此糖要比葡萄糖快。作为定性、定量的实验反应,多使用市售的 D-半乳糖氧化酶( EC1. 1. 3. 9),以其特异生成的 H2 O2 进行比色的方法,现今尤其
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