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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Column Virial RNAOUT 2.0
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是在xuanya柱式病毒RNAOUT的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)或其他液体样品中提取微量病毒RNA的升级产品, 它具有下列特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右。
2. 不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
3. 灵敏度高,通过RT-PCR检测到的最终灵敏度低于50拷贝/mL,比柱式病毒RNAOUT更高。
4. 安全无毒,不需要使用和氯仿等有机溶液。
5. 如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
6. 与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
7. 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
8. 适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

96孔板病毒RNAout(离心法)运输及保存:
常温运输和保存,RNA 病毒裂解液长期(1 周)放置需放 4℃,有效期一年。
自备试剂:无
96孔板病毒RNAout(离心法)使用方法
1. 在 1.5 mL 离心管中加入 0.2 mL 液体病毒样品(如血清、血浆、脑脊液、 尿液、粪便、培养细胞上清液等)。如果病毒需要富集,可以将 1.5 mL 液体在 4℃下 24,000 g 冷冻离心 60 分钟,移弃 1.3 mL 后继续操作。
2. 加入 0.6 mL RNA 病毒裂解液,振荡 30 秒混匀后室温放置 10 分钟。注 意:RNA 病毒裂解液在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 加入 0.6mL 柱式病毒 RNAout 溶液 B,颠倒混匀。此时离心管中混合液的总体积是 1.4mL。
4. 将 0.7mL 混合液将转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
5. 13000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。
6. 再将剩余的 0.7mL 混合液将转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
7. 13000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。
8. 加入 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,13000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。
9. 13000 g 室温离心半分钟。
10. 在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30 uL RNA 洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的 1.5 mL 离心管中,室温放置 2 分钟。
11. 13000 g 室温离心 1 分钟,离心管中收集的样品即为 RNA 溶液。
12. RNA 样品可以直接用于 RT-PCR 或逆转录反应,也可放-80℃长期保存。
96孔板病毒RNAout(离心法)常见病毒:

96孔板病毒RNAout(离心法)疑难解答
Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA 或 DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的 RNA 或 DNA 是作为遗传物质保存,每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种 RNA 分子,每种 RNA 有很 多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸绝对量很少,不能使用电泳和测 OD 检测,只能通过 PCR 或 RT-PCR 检 测,而 PCR 或 RT-PCR 的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。
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