- ￥100 - 2000
- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0068
- 2026年01月27日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Column Vrial RNAOUT
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是在xuanya一管式病毒RNAOUT的基础上开发的、专门用于从血 清(血浆)等液体样品中提取微量病毒RNA的产品，它具有下列特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙 醇。
2. 灵敏度高，通过RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
3. 安全无毒，不需要使用和氯仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5. 与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
6. 价廉物美，性价比远低于国外同类产品。
7. 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
柱式病毒RNA-DNA双提试剂盒运输及保存：
常温运输和保存，RNA 病毒裂解液长期（1 周）放置需放 4℃，有效期一年。
自备试剂：无
柱式病毒RNA-DNA双提试剂盒使用方法
1. 在 1.5 mL 离心管中加入 0.1-0.2 mL 液体病毒样品。如果病毒需要富集， 可以将 1.5 mL 液体在 4℃下 24，000 g 冷冻离心 60 分钟，移弃 1.3 mL 后继续操作。
2. 加入 0.6 mL RNA 病毒裂解液，振荡 30 秒混匀后室温放置 10 分钟。注 意：溶液 A 在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使 沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中，室温放置 2 分钟。
4. 13000 g 室温离心 1 分钟，弃收集管中穿透液。
5. 加入 0.8 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，13000 g 室温离心 1 分钟， 弃收集管中穿透液。
6. 13000 g 室温离心半分钟。
7. 在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-100 uL RNA 洗脱液，然后将离心吸附柱套入一新的 1.5 mL 离心管中，室温放置 2 分钟。
8. 13000 g 室温离心 1 分钟，离心管中收集的样品即为 RNA。
9. RNA 样品可以直接用于 RT-PCR 或逆转录反应，也可放-80℃长期保存。
柱式病毒RNA-DNA双提试剂盒常见病毒：
柱式病毒RNA-DNA双提试剂盒疑难解答
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA 或 DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的 RNA 或 DNA 是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种 RNA 分子，每种 RNA 有很 多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸绝对量很少，不能使用电泳和测 OD 检测，只能通过 PCR 或 RT-PCR 检 测，而 PCR 或 RT-PCR 的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。
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文献和实验，即切胶的那次电泳中，如果切成的条带很清晰，不拖泥带水，没有弥散，没有拖尾，那做回收、连接效果最好。相反，若有弥散、拖尾、不清楚、一团亮等情况就是切的不好，做后续实验成功率会降低。若真是效果很差建议改进体系重新切。 回收 回收可以用柱式试剂盒或手工法。柱式回收试剂盒：此类试剂盒适合各种长度 DNA，对黏性末端基本没有破坏，回收效率也不错。手工醇沉淀法步骤如下，把切得的胶弄碎，用 Tris-HCl 浸泡一段时间，吸出所有的液体，用酚抽提一遍，氯仿抽提一遍，加盐和醇醇沉，沉淀
过夜，其实完全没有必要，我一般酶切3个小时，其实1个小时已经足够。应用大体系，如100微升。纯化问题：纯化PCR产物割胶还是柱式，我推荐柱式，因为割胶手法不准，很容易割下大块的胶，影响纯化效率。现在的柱式纯化号称可以祛除引物，既然如此，酶切掉的几个碱基肯定也会被纯化掉了。所以，PCR产物和双酶切产物的纯化均可应用柱式纯化。我用的是TAKARA的纯化柱试剂盒酶量的问题：以TAKARA的为例，其对1单位酶的定义如下：在50 μl 反应液中，30℃温度下反应1小时，将1 μg 的λDNA完全分解的酶量定义
，因为割胶手法不准，很容易割下大块的胶，影响纯化效率。现在的柱式纯化号称可以祛除引物，既然如此，酶切掉的几个碱基肯定也会被纯化掉了。所以，PCR产物和双酶切产物的纯化均可应用柱式纯化。我用的是TAKARA的纯化柱试剂盒。 酶量的问题：以TAKARA的为例，其对1单位酶的定义如下：在50 μl 反应液中，30℃温度下反应1小时，将1 μg 的λDNA完全分解的酶量定义为1个活性单位(U)。 而该酶浓度约为15单位/微升，在除外酶降解的 因素外，该酶可分解15 μg的DNA，而一般从1-4 ml菌液提出
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