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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
产品及特点
由于血液富含 RNase,因此血液 RNA(主要是白细胞 RNA)非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非 冻型组织 RNA 保存液的基础上,开发了本产品。
冷冻型血液RNA保存液它具有下列特点: 1. 能快速渗透到新鲜抗凝血液中的有核细胞内(主要是白细胞),抑制 RNA 分子的降解。保存的血液白细胞 RNA 常温可放置 3 天,4℃可放置 5 天, -20℃可放置 3 个月。 2. 操作简单,直接将本产品和白细胞样品按比例混合即可。 3. 适用于人新鲜血和哺乳动物新白细胞,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也 不适用于禽类血液和其他动物血液。 4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。 5. 保存的样品可直接用本公司动物 RNAout 提取 RNA。

冷冻型血液RNA保存液运输及保存:
常温运输和保存,有效期两年。 自备试剂 无。
冷冻型血液RNA保存液使用方法
注意:RNase 污染无处不在,最好用本公司的高效无毒固相 RNase 清除剂处 理 RNA 工作区域,千万不要使用烷基化试剂 DEPC。
一、白细胞的分离和保存 1. 本产品保存全血的效果不好,故不建议用于全血的保存。必须先分离白细 胞。 2. 室温 1500-2000 g 离心新鲜血液 10-15 分钟,最上层为血浆,最下层为 红细胞,中间层为膜状的、含白细胞的 Buffy Coat(含白细胞多的血液此 层可能很厚)。 3. 吸出血浆后,小心将中间的白细胞层吸出(允许污染少量红细胞),按 0.5 mL 白细胞加入到 2.5 mL(5 倍体积)的本产品的比例,将两者混合。 4. 如此保存的白细胞可以在常温(不超过 30℃)下放置 3 天,4℃可放置 5 天。如果需要-20℃放置,需要先在 4℃放置 1 天,然后在 13000 g 室温 离心 3 分钟,小心吸出浅粉红色的上清液,再将没有液体保存液的白细胞 沉淀放置在-20℃,如此可放置 3 个月。不能直接有液体保存液的白细胞 悬浮液放置在-20℃,否则凝固形成的冰晶将会刺破白细胞膜,在凝固的 冰晶融化时,白细胞胞浆成分(含 RNA)会进入上清,在离心时丢失,离 心得到的只是细胞残骸。 5. 使用时,对 4℃或以上温度保存的白细胞,将 1.5 mL 本产品和白细胞的 混合物转移到离心管中,13000 g 室温离心 3 分钟。小心吸出浅粉红色的 上清液,沉淀为白细胞,直接用于 RNA 提取。如果是在-20℃保存的已经 按上步方法处理的白细胞沉淀,则直接用于 RNA 提取。
冷冻型血液RNA保存液二、提取 RNA(本产品不提供 RNA 提取相关产品) 6. 建议使用 Trizol 或类似 Trizol 的动物 RNAout(本公司产品)。需要注意 的是在加入IPA沉淀 RNA 时,本产品处理的样品由于盐离子浓度高会 出现两层(即两相,正常样品会出现 RNA 沉淀,不会出现两层),小心去 除上清,然后加入相当于下层体积 2 倍的 50%的IPA,颠倒混匀后 13000 g 室温离心 10 分钟,RNA 将沉淀在管底。再按 Trizol 的标准操 作流程用 75%乙醇洗涤沉淀即可。
三、RNA 的检测(列出步骤仅供参考,本产品不提供相关产品) 7. RNA 完整性的电泳检测:强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳, 因为非变性胶中单链 RNA 分子会自生折叠成各种形状,尤其不能使用 DNA 上样液,因为没有经过去 RNase 处理。 8. RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 用 TE 缓冲液 (pH8.2)稀释 10 倍 后检测其在 OD260 的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA 浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。 9. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具 体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表 示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。
冷冻型血液RNA保存液相关产品:
| 一站式动物 mRNAout |
| 一站式磁珠法动物 mRNAout |
| 一站式全血 mRNAout |
| 一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒 |
| 一站式植物 mRNAout |
| 一站式磁珠法植物 mRNAout |
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| 一站式磁珠法真菌 mRNA 提取试剂盒 |
| mRNA 提取试剂盒 |
| 磁珠法 mRNA 提取试剂盒 |
| Oligo(dT) 纤维素 |
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| 生物素标记的 Oligo(dT) |
| 链霉亲和素磁珠 |
| RNase清除及抑制 |
| 固相 RNase 清除剂 |
| 固相 RNase 清除剂 |
| 气相 RNase 清除剂 |
| 液相 RNase 清除剂 |
| 氧钒核糖核苷复合物 (RVC),0.2M |
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文献和实验样本采集和快速冷冻的时间。 2. 即时加入 RNA 稳定剂,使组织内的 RNase 失活及保护组织中的 RNA。 3. 快速匀浆,加入裂解液若粘稠至不能有效分层,可继续加入更多裂解液。 4. 采用 RNeasy Mini Kit(货号:74104)提取时,可将缓冲液 RLT 中加入的巯基乙醇含量提高至 3%-5%,能够有效改善结果。 血液样本 提取得到的 RNA 量少;由于 RNase 得到的 RNA 完整性较差,有降解;污染物包括抗凝剂-肝素和 EDTA,以及天然酶抑制剂影响下游 RNA
长期保存。 2、组织样本取样后立即-80或者液氮保存。后续用于Q-PCR的取样后立即存于液氮或者-80度环境中,或者放于有trizon或RNA样本保存液的灭菌无RNA酶离心管中-80度保存。 二、样本运输 短时2h左右冰袋或者液氮运输,干冰(干冰可以维持-70度)密封邮寄运输。 三、样本编号 样本标号清晰,切记提供我公司样本清单。 病理实验取样及实验注意事项 1、动物组织提取后(玉米粒大小即可)迅速保存于4%多聚甲醛中固定,管体标号,组织块尽量少带血液
三句话读懂一篇 CNS:复旦大学研究表明,种花、种草有助预防多种疾病;打呼噜可能增加老年痴呆的风险
-opioid receptor。 该研究利用冷冻电镜技术并结合多种细胞水平功能分析和分子动力学模拟等方法,获得芬太尼、吗啡及 Oliceridine 等阿片类镇痛药物分别激活 μ 型阿片受体(μOR)的高分辨率三维结构,首次揭示了芬太尼和吗啡识别并激活 μOR 的作用机制,为开发良好疗效且毒性低的镇痛药物提供了新的角度。 图 1:来源 Cell 2. Nature Biotechnology:开发脱靶率极低的高精度胞嘧啶碱基编辑系统 现有的 C 到 T 碱基转换的胞嘧啶碱基编辑
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









