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文献和实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气。在我们实验室western blot实验历程里，我们用过进口抗体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。 进口抗体一般不会出现闪失：Abcam品种全，质量过硬，但价高；Sigma的价最贵；比较有性价比的是CST的抗体，不足是CST的品种不多。Santa的多克隆抗体质量可以，但是选用Santa的单抗还是有风险，估计这也是业界共识了吧。进口抗体国内分装包装我们也用过不少
电泳缓冲液千万不能回收用，具体愿因你只需上网查查 SDS-PAGE 的原理就知道了。转移电泳缓冲液可以回收再用两次。 转膜我通常是快转两百 200 毫安/2 小时，慢转 80 毫安/12 小时。快转是一定得做冰水浴，就是把槽子泡在冰水混合液里。封闭我通常用 BD 的脱脂奶粉，不贵，260 元 500 克，也是从北京华美买的。 ECL 我用 pierce 的，500 毫升 1650 元，比国产的还便宜好用。胶片是柯达的，以前用过乐凯的，不如柯达。我很少用丽春红或考马斯染膜或染胶
小时。快转是一定得做冰水浴，就是把槽子泡在冰水混合液里。 封闭我通常用BD的脱脂奶粉，不归，260元500克，也是从北京华美买的。 ECL我用pierce的，500毫升1650元，比国产的还便宜好用。 胶片是柯达的，以前用过乐凯的，不如柯达。 我很少用丽春红或考马斯染膜或染胶，总觉得是脱裤子放屁的事。 4. Western Blot实验关键 Western Blot操作步骤多，每一步的失误都会造成全盘失败，综合而言，抗体仍然是决定成败的关键，如果抗体很滥
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