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文献和实验水内,校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵。 56 CAYE培养基此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用Honda氏产毒肉汤。 57 Honda氏产毒肉汤成分:水解酪蛋白 20g酵母浸膏粉 10g氯化钠 2.5g磷酸氢二钠 15g葡萄糖 5g微量元素 0.5mL蒸馏水 1000mLpH7.5制法:溶解后校正pH,高压灭菌121℃ 15min,待冷至45
Staining Methods for cell death Z. Xia 10/2/95
/4%sucrose in PBS, neutral pH, RT 15-45 min if cells are not adhereing well to the plates: Gently overlay over media 2X media vol. of 8 % paraformaldehyde/4% sucrose/ in PBS, pH 7.2-7.6 gently tilt the plates to mix R.T. 15 min
RNA制备。 4 RNA提取及定量:采用TRIzol一步法提取骨髓单个核细胞总RNA,紫外分光光度仪测定OD 260 ,OD 280 吸光值(A),计算RNA含量。 5 cDNA链合成:逆转录反应体积为40ul,包括标本RNA 2ug,六随机引物100ng,5×逆转录buffer 5 ul, 10 mM dNTP 1.25 ul, Rnasin 25 U, 逆转录酶200 U。37℃ 45 min, 95℃ 5 min, -20
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