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- 2025年12月31日
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文献和实验真菌( 100mg)，动物细胞(5×106～1×107)，酵母(1×107) 。 TRIZOL试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如，从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂 糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色，可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带，(mRNA和hnRNA成分)两条优势核糖体RNA条带位于~5 kb (28S)和~2 kb (18S)，低分子量RNA介于0.1 和 0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值&ge
-20℃保存。使用前按照步骤A12～A13 操作溶解RNA。 A12.加50～200μl Buffer TE 充分溶解RNA 沉淀，4℃，≥12000×g 离心2min。 可根据RNA沉积块大小和RNA 使用浓度来决定Buffer TE 的体积。 A13.将上清转移到RNase-free的离心管，置-20℃以下保存。 [B.纯化基因组DNA] B8.在分离到的相间沉淀中加0.4ml 65℃预热的Buffer G-A，用1ml Tip 头快速吹打10次或旋涡振荡15sec，65℃温育5min
-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。 2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2～8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。 3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30～60分钟。预期产量：1mg组织或1×106细胞提取RNA分别为： 肝和脾6～10μg ，肾3～4μg ，骨骼肌和脑组织1～1.5μg ，胎盘1～4μg ，上皮细胞8～15μg
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