血浆/血清游离DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)

特别提示：包括血浆/血清游离DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：血浆/血清游离DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)
英文名称：Extraction kit for cell-free DNA from serum/plasma
产品货号：WH0009
产品规格：50次

本试剂盒采用可以特异性结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，样品裂解后，DNA在高盐条件下与硅胶膜结合，在低盐、高pH值时DNA从硅胶膜上洗脱下来。本试剂盒用于从小剂量的血清/血浆中提取游离DNA，所得游离DNA可直接用作PCR模板、杂交等分子生物学实验。

产品特点：
·采用硅基质膜吸附柱，简单、快速提取循环核酸。
·无需酚仿等有机试剂，安全无毒。
· Carrier RNA可以从体系中高效捕获微量核酸。
·彻底去除污染物和PCR抑制剂，方便下游应用。

试剂盒组成：

组分	50T
缓冲液GA	15ml
缓冲液GB	15ml
缓冲液GD	13 ml
漂洗液PW	15ml
洗脱缓冲液TB	15ml
Proteinase K	1 ml
Carrier RNA	310μg
RNase-Free ddH2O	1 ml
RNase-Free吸附柱CR2	50个
收集管（2 ml)	50个

保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。Carrier RNA配置成储液后置于-20℃。

Carrier RNA储存液的配制：
在第一次使用Carrier RNA时，请将Carrier RNA（310μg）溶解在310μl RNase-Free ddH2O中，将溶液分装储存于-20℃，此时该溶液的浓度为1 μg/μl；该储存液应避免反复冻融，冻融次数不能超过3次。

注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．自备试剂：无水乙醇
2．样品使用量的确定：
  吸附柱zuì大容量：700 μl
  zuì小洗脱体积：20 μl
  样本体积：zuì大量200 μl
3．若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解。
4．所有的样品使用前请平衡到室温（15-25℃)。
5．第一次使用试剂盒时，请按照试剂瓶上的提示在缓冲液GD和漂洗液PW中添加无水乙醇。
6．为了确保从微量样本中得到更多的DNA，试剂盒配备了Carrier RNA。由于Carrier RNA本身是小核酸，所以得到的基因组测定OD₂₆₀值会比真实值偏大，建议将得到的基因组直接用PCR进行检测。

使用方法：
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1．取100 μl -200 μl血清/血浆到2ml的离心管中，如不足100 μl，加缓冲液GA到100 μl终体积。
2．加入20 μl Proteinase K溶液，涡旋混匀。
3．加入200 μl的缓冲液GB （可加入1 μl Carrier RNA储存液，浓度为1 μg/μl），轻轻颠倒混匀，56℃孵育10min，并不时摇动样品。简短离心以去除管盖内壁的液滴。
注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般56℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4．加入200 μl的乙醇（96-100%）。如果室温超过25℃，请将乙醇置冰上预冷。轻轻颠倒混匀样品，室温放置5 min，简短离心以去除管盖内壁的液滴。
5．将上一步所得溶液添加到一个吸附柱CR2中（吸附柱放入收集管中），12000rpm（~13400×g)离心30 sec，弃废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
6．向吸附柱CR2中加入500 μl缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm（~13400×g)离心30 sec，弃废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
7．向吸附柱CR2中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇）12000rpm（~13400×g)离心30 sec，弃废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
8．重复操作步骤7。
9．12000rpm （~13400×g)离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CR2置于室温放置2-5 min，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl洗脱缓冲液TB，室温放置2-5 min，12000rpm（~13400×g)离心2 min，将溶液收集到离心管中。
  注意：洗脱缓冲液体积不应少于20 μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再次加入吸附柱CR2中，室温放置2 min，12000rpm（~13400×g)离心2 min。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

除了血浆/血清游离DNA提取试剂盒（离心吸附柱法),，我公司还供应以下相关产品：



名称：非冻型组织DNA保存液
货号：BTN3660
规格：250mL
本品是我公司推出的在室温条件下长期保存DNA样品的保存液。它能迅速渗入细胞内，通过高效抑制DNase的活性而长期保证DNA的完整性。

产品特点：
1. 保存时间长，可室温保存动植物组织长达两年，保护DNA不被降解。
2. 安全可靠，本产品无毒无害，从DNA保存液保存的样品中提得的DNA可用于酶切和PCR等分子生物学实验。
3. 使用简单，直接把新鲜的动植物样品浸在DNA保存液中即可。
4.可广泛用于各种动植物标本的野外采集。

储存条件：室温运输及保存，有效期两年。

使用方法：

第一步：准备工作
1.估计完全浸没样品所需要Tissue DNA保存液的体积。
注：1g 组织约需10mL Tissue DNA保存液。
2.标记收集管并加入估计所需量的Tissue DNA保存液。

第二步：样品的处理
1.以zuì快速度将样品剪切成厚度小于0.5cm的碎块。
注：鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存，有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
2.将组织碎块完全浸没于收集管的Tissue DNA保存液中。

第三步：样品的存放
将收集管存放于温度适当的地方，保存温度不要低于4℃。

第四步：样品的使用
1.从存放处取出样品，用消过毒的镊子将组织碎块从保护液中取出。
2.立即开始DNA提取。

名称：柱式水样DNA提取试剂盒
货号：BTN101112
规格：50次

名称：特异性显色基质鲎试剂盒
货号：BTN170401
规格：32次
鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品，鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度，pH值及无干扰物质)，细菌内毒素激活C 因子，引起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质，使其分解为多肽和黄色的对硝基*胺(pNA，λmax=405nm)。在一定时间内，pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关，据此，可以定量样品的内毒素浓度。同时，对硝基*胺(pNA)也可用偶氮化试剂染成玫瑰红色(λmax = 545nm)，避免了样品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰。特异性鲎试剂是在鲎试剂的配方中添加G因子旁路抑制剂，使鲎试剂对(1,3)β-D-葡聚糖产生假阳性反应，使检测结果更加准确可靠。本鲎试剂对细菌内毒素的反应是特异的，抗干扰能力比普通鲎试剂更强，使用时只需用细菌内毒素检查用水直接溶解即可，不需另外添加G因子抑制剂(抗增液)。

试剂盒特点：
1. 仅用于体外细菌内毒素的定量检测，严禁试剂以任何途径进入机体。
2. 接触试剂及样品的所有器皿必须是除热原的。实验过程应防止微生物的污染。该说明书中的除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。玻璃器皿可经250℃干烤至少60分钟去除热原。
3. 待测样品的pH值应在6.0–8.0之间，若超出此范围，需用除热原的缓冲液、0.1M氢氧*钠或0.1M 盐酸调节。
4. 当样品中可能存在鲎实验的干扰物质时，须进行干扰实验。

试剂盒组成：

成分	规格
细菌内毒素标准品	2支
特异性鲎试剂	2 支×1.7mL
显色基质	2 支×1.7mL
偶氮化试剂1	2 支×10mL
偶氮化试剂2	2 支×10mL
偶氮化试剂3	2 支×10mL
HCl(反应终止剂)	50ml
细菌内毒素检查用水	50mL×2 瓶
除热原试管，10×75mm	10×5 支
除热原吸头，1000VL	10×4 支
除热原吸头，200VL	1盒

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期两年。