12脂氧合酶抗体说明书

12脂氧合酶抗体说明书英文名称  Anti-ALOX12/12 Lipoxygenase
中文名称  12脂氧合酶抗体说明书
别    名 别 名 12 Lox; 12(S) lipoxygenase; 12S LOX; Alox 12; Alox12; Alox12L; Alox15; Arachidonate 12 lipoxygenase 12S type; Arachidonate 12 lipoxygenase; Arachidonate 12 lipoxygenase leukocyte type; Arachidonate 12 lipoxygenase, 12S type; Arachidonate 12 lipoxygenase, leukocyte type; EC1.13.11.31; LOG 12; LOG12; Platelet type 12 lipoxygenase; Platelet type lipoxygenase 12; P-12-LOX.

浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Cow
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 心血管 免疫学 转录调节因子 激酶和磷酸酶 合成与降解
蛋白分子量 predicted molecular weight：
73kDa  
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human 12 Lipoxygenase
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
（石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 12 Lipoxygenase is a non heme iron containing dioxygenase which stereospecifically incorporates molecular oxygen into cis,cis-1,4-pentadiene containing polyunsaturated fatty acids. Murine leukocyte 12 Lipoxygenase oxidizes arachidonic acid to 12(S)-HpETE and 15(S)-HpETE in a ratio of 3：
1. Murine leukocyte 12 Lipoxygenase is a 75 kDa protein which is 58% homologous to murine platelet 12 Lipoxygenase, and 70% homologous to porcine leukocyte 12 Lipoxygenase.  
Subcellular Location ：
Cytoplasm.  



12脂氧合酶抗体说明书抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
12脂氧合酶抗体说明书抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
CL-0403NCI-H524(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2
ESAM Others Rat 大鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL
293-mTLR5 人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 293-mTLR5 DMEM+10% FBS+10ug/ml Blasticidin
IL36A Protein Human 重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白 (His 标签)
NEC(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 22RV1(前列腺癌细胞)
12脂氧合酶抗体说明书SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)   5×106cells/瓶×2
SHZ-88(大鼠癌细胞)   5×106cells/瓶×2
SiHa(人颈鳞癌细胞)   5×106cells/瓶×2
SK-BR-3(人癌细胞)   5×106cells/瓶×2
12脂氧合酶抗体说明书技术外包服务:
★分子生物学：质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物学：基因合成、引物合成、基因测序、载体构建等
★蛋白工程：原核、哺乳动物蛋白表达系统等
★病毒包装：腺病毒、慢病毒等
★抗体工程：磁珠分选、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等
★细胞工程：细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)、细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术等等。