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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
Gram Staining
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5ml*8
| 产品名称 | 英文名称 | 价格 |
| 革兰氏染色液说明书 | Gram Staining | 来电可享受优惠 |
英文名称:Gram Staining
产品规格:5ml*8
产品用途:用于细菌革兰氏染色试验1.涂片经火焰固定,加(结晶紫溶液)溶液A染1分钟,用清水冲去染液。2.加(碘液)溶液B染1分钟,水洗。3.加(脱色液)溶液C,不时摇动玻片约10-30秒,至无紫色脱落为止,水洗。4.加溶液D,染1分钟,水洗。5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。
培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
革兰氏染色液说明书(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
用于微生物分离,鉴定,计数。如图,微生物分离成菌落、菌苔。图中为大肠杆菌菌落,是用涂布平板法得到。
用于分离微生物的固体培养基
用于分离微生物的固体培养基
(2)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
用于观察微生物运动特征。如图,左侧试管中微生物不运动,而右侧试管中微生物运动,因而两试管中现象不同
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
(3)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业。
【实验方法】
革兰氏染色液说明书1.培养基阳性组:取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中,每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中,用于计数,每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组:即空白对照,即不添加菌液。
3. 接种量计数:步骤1中的平皿中,细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基,霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件:
无菌检查:20~25℃培养14天或直至出现浑浊(不超过14天)
MPN计数:30~35℃培养箱中培养3天
控制菌检查:30~35℃培养箱中培养18~24小时
倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30~35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20~25℃培养箱中培养3~5天
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改良CCD琼脂添加剂用于添加HB0274-1中
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4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基MUGMedium用于大肠杆菌酶底物法检测
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注意事项:
◆革兰氏染色液说明书标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
◆冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。
◆浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。ELISA实验标准曲线平直,一般有以下原因:标准曲线制备是否不当,洗孔不净,吸孔不充分,读数不准确或是吸量误差。查找原因,即可找到相应解决方案。
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文献和实验色,为绿脓菌素试验阳性,否则为阴性。本菌为绿脓菌素试验阳性。 荧光试验:接种于金氏B 培养基(或假单胞菌产荧光色素培养基) 上,36℃±1℃ 培养18-24 小时,在366nm 紫色灯下有蓝绿色荧光。 2.4 枯草芽孢杆菌: 菌落形态:表面粗糙不透明,有皱摺。 镜检:用芽孢染色液染色,菌体有芽孢。 2.5 白色念珠菌: 革兰氏染色试验:呈卵圆形,很象酵母菌,比葡萄球菌大5~6 倍,革兰氏染色阳性,但着色不均匀。 念球菌显色培养基:30-35℃ 培养24-48 小时,呈绿色菌落
℃下将收集的血浆分装保存,避免反复冻融。样本应避免溶血或高血脂。常见的抗凝剂包括EDTA钠盐,肝素钠,枸橼酸钠等。检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书,查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求。 细胞培养上清 将细胞培养上清液吸入离心管中,在2-8℃下以1000×g离心20分钟,除去细胞碎片和杂质,收集上清液备用,样本保存在-20℃或-80℃,避免反复冻融。 细胞提取液 反复冻融方法 1) 吸出培养板中的培养基,用胰蛋白酶消化细胞,然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮
。 3. 排除泵内气泡:逆时针旋开左边泵头的黑色旋扭2~3 圈,点击仪器控制界面“淋洗液阀 (Eluent Valve)”模块中的“开(on)”,约数秒后再把旋扭旋紧,等待数分钟后观察压力是否稳定;如压力波动较大,重复上述操作,直至压力稳定。 4. 在仪器控制界面上点击“开泵” ,等待系统平衡。 二、分析步骤: 1. 建立程序文件program file (可省略),参考软件 说明书。 2. 建立方法文件method file (可省略),参考
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