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文献和实验DETECTION OF ß-GALACTOSIDASE AND ALKALINE PHOSPHATASE ACTIVITIES IN TISSUE
EGTA stock, pH 8.0) in 100 ml PBS, pH 7.2-7.4 Heat about 80ml H2 O to 600 C and add paraformaldehyde; add 1-2 drops of 10M NaOH to get paraformaldehyde in solution. Cool to room temperature, add 10 ml 10X PBS, adjust pH with HCl, add MgCl
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
得到:1 A280 =1.62 mg/ml。 4. 酶活力测定 1) 氨基酸活化反应的条件如下:35ul反应液中含有100 mM HEPES (pH 7.8),10mM KF,10 mM MgCl2 ,4 mM ATP,2 mM [32 P] PPi和1 mM亮氨酸,在37o C保温,用约4 nmol/L LeuRS起始反应,于不同时间,取出15ul反应液,加入200ul淬灭液中(3.5%高氯酸,2%活性炭和0.05 M焦磷酸钠)停止反应,在淬灭液中再加入5毫升10 mM焦
)17.5g。将上述成分依次用蒸馏水溶解、混匀,然后加蒸馏水至500ml,置4℃冰箱保存。 2.底层基本培养基 取VB液(10倍)100ml,加入蒸馏水800ml,用1mol/L NaOH调pH至7.0,然后加入琼脂12—15g,经121℃20分钟高压灭菌。待冷至800C左右时,加入100ml已经112℃20分钟高压灭菌的20%葡萄糖液,混匀后浇制平板。 3.上层培养基 D- 生物 素12.4mg,L-盐酸组氨酸9.5mg,NaCl5g,琼脂6g
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