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- 文献和实验
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RT
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见标签
- 库存:
999
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
500mL
说明
一般描述
Gey′s平衡盐溶液是一种磷酸盐碳酸氢盐缓冲细胞悬浮液和洗涤液。其是一种完整的平衡盐溶液,具有不同“盐形式”的独特组合。其含有与EBSS、HBSS和DPBS相同的五种基本离子。
应用
Gey平衡盐溶液已用于:
器官型小鼠脑切片培养[1]
小鼠原代肝窦内皮细胞的分离(LSEC)[2]
器官型海马切片培养[3]
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文献和实验Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
培养液洗去Percoll。4)收集E+细胞:尽量吸弃红细胞上的Percoll溶液,用5ml Gey’s液悬浮细胞1~2分钟,溶解红细胞。立即将加入同量两倍浓缩的PBS,恢复等渗,离心500×g 10分钟,去上清液。再用RPMI-1640培养液同样洗涤2此。5)分别用RPMI-1640培养液悬浮E+和E-细胞,计数细胞。用荧光标记的抗体测定制剂中的B细胞、T细胞和单核细胞百分比。二、用尼龙毛分析T细胞尼龙毛柱的制备(注意无菌操作)1.取直径3D,长度约10cm的尼龙毛,用0.2mol/L HCl浸泡
到离心机,500 g 离心 25 min。 小心取出离心管,吸取中间层的白色薄膜层,即为单个核细胞。 用 10 mL PBS 洗涤获得的单个核细胞,250g 离心 10 min,弃上清。 重复洗涤一次。 用细胞染色缓冲液重悬细胞备用。 注意事项: Ficoll 使用时的温度很重要,温度太高或者太低都会影响分离效果。 血液样本最好为新鲜抗凝血(采血 2 h 以内),为保持细胞活力,应避免冷冻和冷藏。 3.50 mL 离心管离心效率比 15 mL 离心管差,为了获得最大量的单核细胞,最好用15
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