洁特6.0cm一次性细菌培养皿

细胞培养注意事项（入门级）

胰酶消化（如果是9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，可以加入1mL完全培养基；现在培养瓶（皿）里有2mL溶液）。6） 现在可以将溶液进行分瓶（2mL）。如果是细胞株，直接均分到两个培养瓶（皿）里。如果是原代培养，可以根据消化时间来对细胞进行分离；因此可以将溶液（2mL）都转入新的培养瓶（皿）。7） 将两个培养瓶（皿）补足完全培养基到正常体积（果是9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，为5mL完全培养液）8） 镜下观察。刚刚传代细胞还没贴壁，悬浮在溶液中，呈圆形。一般2h之内会贴壁

小鼠肿瘤样本单细胞悬液的制备及注意事项

小鼠肿瘤样本制备 颈椎脱臼法将荷瘤小鼠处死，75% 酒精浸泡 5 min，取出小鼠置于无菌操作台上。 左手持镊子，右手持弯剪，沿肿瘤边缘剪下长约 1cm 的口子，可清晰看见肿瘤附着于皮下，沿肿瘤边缘轻轻剪开连接处，剥离肿瘤。 将剥离的肿瘤放入100 mm 的培养皿中，并在室温下加入 5~10 mL 的 1640 基础培养基。 单细胞悬液的制备 A.混合酶消化法 待所有肿瘤剥离完毕后，将肿瘤转移至 1.5 mL EP 管中，手持弯剪将肿瘤充分剪碎，边剪边加入1640基础培养基，静置数秒

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

在LIF存在的条件下维持细胞培养 第2步：EB培养基       使用细菌培养皿去除LIF后胚状体的形成需要4天。 1、分散纯化细胞（参见上面的细胞传代部分） 2、纯化2小时后将细胞转入含有ES培养基的50ml Falcon管中，计数细胞取适量体积放入15ml管中离心3分钟。 3、用2mlEB培养基重悬细胞，吹打至少10次制成单细胞悬液 4、一个15cm的细菌培养皿接种4～5×106个细胞（1个完全融合的组织培养皿通常足以接种4个同样规格的细菌培养皿）。 5、2天后更换