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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒
- 库存:
45
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 应用:
检测法
- 检测方法:
高效液相色谱法
- 检测范围:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 规格:
100T
1. 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒100T品牌 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
产品介绍:
产品名称:辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒100T品牌
规格:100T
测试方法:高效液相色谱法
测定意义:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD是糖酵解和TCA循环的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态,NADH/NAD比值
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒100T品牌液体类标本(细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等);2、样本保存:请尽早检测,2-8℃保存一天;需更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集样本,请将样本及时分装标号后,置-20℃或-70℃保存;3、请提前告诉我们:您样本的种属、样本数量、待测指标及其他特殊要求。
注意事项:
①辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒100T品牌加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase
异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase 有两种类型的酶:要求以 NAD为辅酶的酶( EC1. 1. 1. 41)和要 NADP的酶( EC1. 1. 1. 42),两者催化同一反应。 异柠檬酸 NAD( P) α -酮戊二酸 CO2 NAP( P) H H4 在三羧酸循环中正常起作用的是要求 NAD为辅酶的酶,此酶是为 ADP激活的变构酶。
)( H.von Euler ),后来知道,辅酿酶是以烟酰胺为组成成分的 NAD 。 NAD 也可以看成是脱氢酶的共同底物,由于两个脱氢酶作用,在发酵中间产物之间进行氢的传递(例如乙醛被甘油醛 -3- 磷酸还原),或者起着把从底物接受的氢转移给呼吸链的载体的作用。 NAD 是作为维生素取获的烟酸,烟酰胺在体内由 ATP 参与的酶反应所合成的。这种水溶性维生素多数在体内变成辅酶,和酶蛋白一起在转移底物化学基团的酶反应中起着作用。(见下表)。此外,与维生素无关的物质还有与磷酸等基团转移有关的 ATP
系可逆地催化醇脱氢形成醛(或酮)的酶,参与醇的发酵。 EC1. 1. 1. 1。 CH3 CH2 OH NAD CH3 CHO NADH H 。底物专一性较广,亦作用于其他的醇。除酵母外,也广泛存在于高等植物(特别在发芽时活性增强)、动物肝脏、细菌等生物界。已从酵母( E. Negelein, H. J. Wulff1937)或肝脏中以结晶状态被提取出来。由酵母获得的结晶分子量约 15万,由 4个亚基组成,与 4个 NAD 及锌结合的 SH酶。肝脏
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