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文献和实验37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; 二、新生SD大鼠心房肌细胞的α-actin免疫荧光鉴定:1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育
方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; 二、新生SD大鼠心房肌细胞的α-actin免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗
Diego, CA); GSK-3α (Upstate, LakePlacid, NY); and b-actin (Sigma, St. Louis, MO). 7. Secondary antibodies: anti-mouse and anti-rabbit IgG conjugatedto horseradish peroxidase (Santa Cruz Biotechnology,Santa Cruz, CA). 8. Enhanced chemiluminescent
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