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PⅢNT ELISA Kit使用说明书

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  • 上海邦景
  • 人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
  • BJ-R12683
  • 进口、国产
  • 2025年07月15日
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    • 详细信息
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    • 样本

      Rat procollagen Ⅲ N-terminal peptide, PⅢNT Elisa Kit

    • 库存

      22

    • 标记物

      详见说明书

    • 适应物种

      人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等

    • 应用

      双抗夹心法

    • 检测方法

      双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。

    • 检测范围

      人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。

    • 供应商

      上海邦景

    • 规格

      96T/48T

    产品名称:PNT ELISA Kit使用说明书
    英文名称:Rat procollagen N-terminal peptide, PNT Elisa Kit
    规格:96T/48T
    检测标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。提供免费代测服务。
       格:96T/48T
       存:2-8
    主要用途:科研检测

    产品细节图片1
    PNT ELISA Kit使用说明书1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
    2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

    产品细节图片2
    3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
    产品细节图片3
    1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
    2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
    3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
    4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
    5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
    6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
    1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
    2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
    3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
    4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
    5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
    6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

    PNT ELISA Kit使用说明书安全性
    1)避免直接接触停止液和底物AB。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
    2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
    3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
    PNT ELISA Kit使用说明书样本处理及要求:
    1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
    2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
    3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
    4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
    6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融.
    7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    产品细节图片4
    改良MRS乳酸菌琼脂培养基MRS Lactotacillus Agar Modified品牌作用;生化研究
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    L---甘三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-甘氨酸/二甘氨酰甘氨酸/三甘氨肽/三甘氨酸/Gly-Gly-Gly;BR98%;1克,Sigma-AldrichAmrescoAmershamServaAppliChem等品牌;556-33-2;RT

    L---异白三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-异亮氨酸/Glycylglycyl-L-isoleucine;BR98%;1克,Sigma-AldrichAmrescoAmershamServaAppliChem等品牌;69242-40-6;RT
    L---缬三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-缬氨酸/Gly-Gly-Val;BR98%;1克,Sigma-AldrichAmrescoAmershamServaAppliChem等品牌;20274-89-9;RT
    牛磺酸/2-氨基乙磺酸/牛胆碱/氨基乙磺酸/牛胆素/Taurine;BR99%;25克,Sigma-AldrichAmrescoAmershamServaAppliChem等品牌;107-35-7;RT
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    焦锑酸钾Potassium pyroantimonate12208-13-8含量:≥98.0%

    硅酸钾Potassium silicate1312-76-1含量:≥98.0%
    钨酸钾Potassium tungstate7790-60-5含量:≥98.0%
    乙酸钾Potassium acetate 127-08-2 含量:≥98.0%
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    产品细节图片5
    PNT ELISA Kit使用说明书1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
    2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液11稀释后参加50ul于反响孔内。
    3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37温育1小时。
    4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
    5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37温育30分钟。
    6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
    7)每孔参加底物AB50ul,悄悄振动混匀,37温育10分钟。防止光照。
    8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
    9)在450nm波利益测定各孔的OD值。

     

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