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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
醇脱氢酶(ADH)测试盒
- 库存:
36
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 应用:
检测法
- 检测方法:
微量法
- 检测范围:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 规格:
100管/96样
产品名称: 醇脱氢酶(ADH)测试盒100管/96样使用说明书
规格:100管/96样
测试方法:微量法
测定意义:ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶,催化乙醇可逆转换,在很多过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成,肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。
注意事项:
①醇脱氢酶(ADH)测试盒100管/96样使用说明书加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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操作流程:
1. 醇脱氢酶(ADH)测试盒100管/96样使用说明书 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
醇脱氢酶(ADH)测试盒100管/96样使用说明书 液体类标本(细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等);2、样本保存:请尽早检测,2-8℃保存一天;需更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集样本,请将样本及时分装标号后,置-20℃或-70℃保存;3、请提前告诉我们:您样本的种属、样本数量、待测指标及其他特殊要求。
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文献和实验ul 0ul 其次,将以上浓度的标准溶液依次加入96孔板中,每孔加40ul,制作平行孔。之后,将样品上清液用1×PBS稀释50倍(或100倍),混匀,以每孔40ul加入上述96孔板中,制作平行孔。 根据不同浓度BSA在595 nm的不同的紫外光吸光值,用酶标仪测定样品在595 nm处的吸光值,用excel求出一元线性回归方程(y=kx+b),其中y是吸光值,x是测定的样品上清液的浓度,求出
。有的酶标仪可用双波长式测读,即每孔先后测读两次,第一次在最适波长(W1),第二次在不敏感波长(W2),两次测定间不移动 ELISA 板的位置。例如 OPD 用 492nm 为 W1,630nm 为 W2,最终测得的 A 值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。 各种酶标仪性能有所不同,使用中应详细阅读说明书。 7. 结果判断 7.1. 定性测定: 定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出 "有"或"无"的简单回答,分别用"阳性
)乙醇、1%(V/V)0.1% TFA 溶液配制 2 mg/ml α- 氨基- 4 - 烃基肉桂酸 (α- cyano- 4 - hydroxycinnamic acid)。 ( 2 ) 胰蛋白酶酶解产物,如乙醇脱氢酶( ADH ) 的酶切产物。3. 注释 注 1 : 由于谷物储藏蛋白可能溶于乙酸溶液,固定这类蛋白质需用 TCA 代替乙酸。 注 2 : 用 50 mmol/L 乙酸溶解胰蛋白酶,分成小份,储存于取一小份加入酶解缓冲液,工作浓度约为 0.125 μg/μl
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