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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
Rat 15-lipoxygenase, 15-LO/LOX Elisa Kit
- 库存:
22
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等
- 应用:
双抗夹心法
- 检测方法:
双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
- 检测范围:
人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
- 供应商:
上海邦景
- 规格:
96T/48T
15-LO/LOX ELISA Kit使用说明书1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
| 1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 |
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 |
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产品名称:15-LO/LOX ELISA Kit使用说明书
英文名称:Rat 15-lipoxygenase, 15-LO/LOX Elisa Kit
规格:96T/48T
检测标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。提供免费代测服务。
规 格:96T/48T
保 存:2-8℃
主要用途:科研检测
15-LO/LOX ELISA Kit使用说明书样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
15-LO/LOX ELISA Kit使用说明书1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
人颅骨造骨细胞裂解物HCOL
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠淋巴瘤细胞;EL4
LX-2细胞,人肝星形细胞正常 人胚胎眼巩膜成纤维细胞,HFSF细胞 家猫肺细胞;FCA-L2
LoVo(人大肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-21110 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium KIT, 上皮细胞生长培养基套装 500ml
HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
小胶质细胞培养基MM-prf
大鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL
H-4-IL-E 大鼠肝细胞瘤细胞 H-4-IL-E hepatoma cells of rats MEM90%(内2mM Glutamin)+10%胎牛血清,补加非必须氨基酸(100x)
EGF Protein Mouse 重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白
MuM-2B(人眼脉络黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 脐静脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
EAC(小鼠艾氏腹水癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Eca-109(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2
EL4(小鼠淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
ES-2(人透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠骨形成蛋白elisa试剂盒 小鼠骨形成蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠骨形成蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠骨形成蛋白试剂盒、小鼠骨形成蛋白eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胶原酶Ielisa试剂盒 小鼠胶原酶I试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胶原酶I试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胶原酶I试剂盒、小鼠胶原酶Ieisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠胶原酶IIelisa试剂盒 小鼠胶原酶II试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胶原酶II试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胶原酶II试剂盒、小鼠胶原酶IIeisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠降钙素elisa试剂盒 小鼠降钙素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠降钙素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠降钙素试剂盒、小鼠降钙素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒
HumanCardiacmyosin-lightchains1,CMLC-1ELISAKit 人心肌肌凝蛋白轻链1(CMLC-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAmylinELISA试剂盒人胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物蛋白巯基/结合巯基含量荧光定量检测试剂盒20次
MonkeyInsulin,INSELISAKit猴胰岛素(INS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
15-LO/LOX ELISA Kit使用说明书大鼠细胞色素P450氧化还原酶(CPR)ELISA试剂盒 ,英文名: CPR ELISA Kit
Mouse neuron specific enolase (NSE) ELISA Kit 小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒
Mouseapoprotein,apo-A1ELISAKit 小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHSP-90(HumanHeatShockProtein90)ELISAKit人热休克蛋白90规格:48T/96T
细胞JNK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-2sRα大鼠白介素2可溶性受体α链规格:48T/96T
15-LO/LOX ELISA Kit使用说明书安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
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文献和实验ELISA 实验失败可能由多种因素造成。在实验前阅读并充分了解产品说明书,可以一定程度上避免出现意想不到的结果。参考以下提示来避免实验出现问题。 1. 检查试剂盒的保质期,保证所有试剂按说明书上的建议正确保存; 2. 检查试剂溶液是否存在不稳定或降解迹象,如沉淀或变色等; 3. 底物溶液应为无色; 4. 试剂制备和保存时应使用干净的一次性塑料吸量管、枪头和容器。每次加液(样品、标准品及其他试剂)时,及时更换枪头,避免交叉污染; 5. 确保孵育时间和温度与规定的高度一致; 6. 盒中试剂不能
正确地清洗酶标板是成功完成 ELISA 实验的关键之一。稀释浓缩洗涤液时应使用去离子水或蒸馏水。 以下是正确清洗酶标板的注意事项: 使用多通道移液器 首先,检查酶标板确保其牢固放置于板架上。随后,翻转酶标板倾倒液体。按照说明书所示体积在每孔加入洗涤液。按照推荐的时间,计时器设置洗涤液浸泡时间。再次翻转酶标板倒出液体,用干净的吸水纸轻拍,将孔内液体拍干。按照说明书建议的次数重复以上步骤。最后一次在吸水纸上拍干后迅速进行下一步操作。避免孔内液体自然风干。 使用多管道分液器或洗板机 使用
的枪头。不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积。 洗涤技术 如果使用自动洗板机或多通道移液器,请确保进出口能正常运作。 最后一次洗涤后,翻转酶标板倒出多余的洗涤液,并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低精确度。不能让孔内液体自然风干,需立即进行下一步操作。 按照说明书,添加足量的洗涤液至孔内,并保证洗涤完全。 由于洗涤液不是通用的,当试剂盒内的洗涤液用完时,请不要使用其他试剂盒中的洗涤液。如有需要,可联系技术支持寻求帮助。 不要减少或增加洗涤时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤。 按照说明书
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