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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
10 set
用于组织透明化样品的成像室
透明室
透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成，它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片，分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm，可根据您的样品选择所需尺寸。
硅橡胶板的两侧贴有保护膜，可在使用时剥离，从而使载玻片与盖玻片紧密接触。
◆透明化工序（使用SeeDB时）
1. 在4°C下用4％多-聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑，过夜。
2. 用PBS清洗3次样品（各10 min）。
3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下，用旋转器旋转试管4~8 h（月4 rpm）。易损的样品
3. 和切片可使用跷跷板振荡摇床。（约17 rpm）。
4. 将样品转移至装有SeeDB：40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转4~8 h。
5. 将样品转移至装有SeeDB：60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转4~8 h。
6. 将样品转移至装有SeeDB：80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转12 h。
7. 将样品转移至装有SeeDB：100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转12 h。
8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中，室温下旋转24 h。
图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化
从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿（胎儿12天），新生小鼠（生后3天）的全脑，成年小鼠大脑切片（8周龄，厚度2 mm）的案例。
◆安装方法
1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室
2. 使用SeeDB时，请使用SeeDB液安装样品。
*若样品较小，观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。
◆观察
1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。
*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高，为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜，油浸透镜以及透明化用透镜，但是水浸透镜的使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用
*各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜（折射率1.0）或水浸物镜（折射率1.33）获得图像时，深度的数值需进行校正。
*（校正公式请参阅参考文献）。
◆观察实例
图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周龄）大脑荧光图像
图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周龄）大脑荧光图像
◆产品列表
| 产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
产品等级 |
| See Through Chamber, 0.3 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
|
| See Through Chamber, 0.5 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
|
| See Through Chamber, 1.0 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
|
| See Through Chamber, 2.0 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
|
| See Through Chamber, 3.0 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
◆相关产品
| 产品编号 |
产品名称 |
包装 |
规格 |
| SeeDB Trial Kit |
1 kit |
组织透明化 |
|
| SeeDB:20w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
| SeeDB:40w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
| SeeDB:60w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
| SeeDB:80w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
| SeeDB:100w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
| SeeDB |
250 mL |
组织透明化 |
|
| Para-formaldehyde |
100 g |
组织固定用 |
|
| 500 g |
|||
| 1×PBS(-) |
5 L |
生化学用 |
|
| DiIC18(3) |
10 mg |
细胞生物学用 |
|
| 50 mg |
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文献和实验参考文献
1）Ke, M. T., Fujimoto, S. and Imai, T. : Nat Neurosci ,6 (8),1154 (2013).
2）Ke, M. T., Fujimoto, S. and Imai, T.: Bio-protocol 4(3), e1042 (2014).
3）Ke, M. T., and Imai, T. : Curr Protoc Neurosci ,66,2.22.1-2.22.19 (2014).
观察。此种方法简单有效，脑样本浸入含有氨基醇的混合物中，通过单光子激发显微镜便可快速进行全脑成像（图 3）。经灌注固定后的组织器官按顺序浸泡到 1/2 Reagent-1、Reagent-1、1/2 Reagent-2、Reagent-2 中（表 1），37℃ 水浴，以 60 rpm 的速度轻微震荡即可透明。透明后的样品转移到 Imaging Oil 中固定 1 小时后可在光镜下观察。CUBIC 适用于成人大脑中荧光蛋白或免疫染色样品的多色成像，并且与全脑细胞核复染方案和计算图像分析管道一起，可视
构成海绵动物沟系中心的小室，它的壁由领细胞组成，通过领细胞的鞭毛运动，把水经由小孔→流入沟→前幽门孔形成的水流朝后幽门孔→流出沟→胃腔→出水口的方向推动，摄取水中的微生物作为食物。此外并还在此处进行呼吸和排泄。单沟型（ as-con type）沟系的海绵无鞭毛室，其领细胞在胃腔壁上。
为具有 O-β -D-葡萄糖醛酸基（ 1→ 3） -N-乙酰基 -β -D-氨基葡萄糖基（ 1→ 4）为单位的双糖重复结构的一种粘多糖。除见之于动物的关节液和眼球玻璃体等的分泌液、脐带、真皮表层等的结缔组织和 Rous肉瘤等某种肿瘤外，它还包括 A型、 C型链球菌属（ Strepto-coceus）在内的某些细菌的荚膜成分。细菌透明质酸不与蛋白质结合，但动物组织中的透明质酸或多或少含有一些蛋白质，似乎以蛋白多糖和肽多糖的形态存在。不过与蛋白质部分结合的方式还不清楚。链
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