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10 set
用于组织透明化样品的成像室
透明室
透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成,它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片,分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm,可根据您的样品选择所需尺寸。
硅橡胶板的两侧贴有保护膜,可在使用时剥离,从而使载玻片与盖玻片紧密接触。
◆透明化工序(使用SeeDB时)
1. 在4°C下用4%多-聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑,过夜。
2. 用PBS清洗3次样品(各10 min)。
3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下,用旋转器旋转试管4~8 h(月4 rpm)。易损的样品
3. 和切片可使用跷跷板振荡摇床。(约17 rpm)。
4. 将样品转移至装有SeeDB:40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。
5. 将样品转移至装有SeeDB:60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转4~8 h。
6. 将样品转移至装有SeeDB:80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。
7. 将样品转移至装有SeeDB:100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中,室温下旋转12 h。
8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中,室温下旋转24 h。
图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化
从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿(胎儿12天),新生小鼠(生后3天)的全脑,成年小鼠大脑切片(8周龄,厚度2 mm)的案例。
◆安装方法
1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室
2. 使用SeeDB时,请使用SeeDB液安装样品。
*若样品较小,观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。
◆观察
1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。
*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高,为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜,油浸透镜以及透明化用透镜,但是水浸透镜的使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用
*各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜(折射率1.0)或水浸物镜(折射率1.33)获得图像时,深度的数值需进行校正。
*(校正公式请参阅参考文献)。
◆观察实例
图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像
图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠(10周龄)大脑荧光图像
◆产品列表
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
产品等级 |
See Through Chamber, 0.3 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
|
See Through Chamber, 0.5 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
|
See Through Chamber, 1.0 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
|
See Through Chamber, 2.0 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
|
See Through Chamber, 3.0 mm thick |
10 set |
Tissue Optical Clearing Reagent |
◆相关产品
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
规格 |
SeeDB Trial Kit |
1 kit |
组织透明化 |
|
SeeDB:20w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
SeeDB:40w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
SeeDB:60w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
SeeDB:80w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
SeeDB:100w/v% Fructose Solution |
250 mL |
组织透明化 |
|
SeeDB |
250 mL |
组织透明化 |
|
Para-formaldehyde |
100 g |
组织固定用 |
|
500 g |
|||
1×PBS(-) |
5 L |
生化学用 |
|
DiIC18(3) |
10 mg |
细胞生物学用 |
|
50 mg |
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。
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参考文献
1)Ke, M. T., Fujimoto, S. and Imai, T. : Nat Neurosci ,6 (8),1154 (2013).
2)Ke, M. T., Fujimoto, S. and Imai, T.: Bio-protocol 4(3), e1042 (2014).
3)Ke, M. T., and Imai, T. : Curr Protoc Neurosci ,66,2.22.1-2.22.19 (2014).