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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
羟自由基清除能力测试盒
- 库存:
54
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 应用:
检测法
- 检测方法:
微量法
- 检测范围:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 规格:
100管/96样
产品介绍:
产品名称:羟自由基清除能力测试盒100管/96样品牌
规格: 100管/96样
测试方法:微量法
测定意义:羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类品和药品研究中得到广泛应用。
注意事项:
①羟自由基清除能力测试盒100管/96样品牌加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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锡酸钠/Sodium stannate;AR,98%;500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;12058-66-1;RT
酒石酸氢钠/重酒石酸钠/酸性酒石酸钠/2,3-二-[R-(R*,R*)]-丁二酸单钠盐/一水酒石酸氢钠/Sodium bitartrate monohydrate;AR,99%;500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;526-94-3或6131-98-2;RT
月桂酸钠/十二酸钠/Sodium dodecanoate;CP;250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;629-25-4;RT
油酸钠/十八烯酸钠/(Z)-9-十八烯酸钠盐/9-十八烯酸钠/十八碳烯-[9]-酸钠/顺式-9-十八烯酸钠盐/顺-9-十八烯酸钠盐/Sodium oleate;CP;250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;143-19-1;RT
硬脂酸钠/十八酸钠/Sodium stearate;CP;250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌;822-16-2;RT
三(2-羧乙基)膦盐酸盐TCEP51805-45-9含量:≥98.0%
抗生素类;含量:≥98.0%
利福平Rifampicin13292-46-1含量:≥98.0%
红霉素Erythromycin
杆菌肽锌Bacitracin zinc1405-89-6含量:≥98.0%
IL21 Protein Human 重组人 Ierleukin-21 / IL-21 蛋白
胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人细胞裂解液 (阳性对照)
AGS人胃腺癌细胞 AGS human gasic cancer cells F-12+10% FBS
婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-3
人齿根膜韧带成纤维细胞(HPDLF)( 5×105 ) rEPC,大鼠内皮祖细胞-骨髓 Rattus
CM-H061人肾小球内皮细胞完全培养基100mL
CD177 Others Human 人 CD177 / PRV-1 / PRV1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人真皮淋巴内皮细胞HDLEC
Hs 1.Tes细胞,正常人细胞 人癌细胞,Hs-578T细胞 心肌细胞培养基CMM
大额牛皮肤细胞;BFR-S3
KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人细胞裂解液 (阳性对照)
羟自由基清除能力测试盒100管/96样品牌IL21 Protein Human 重组人 Ierleukin-21 / IL-21 蛋白
胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人细胞裂解液 (阳性对照)
AGS人胃腺癌细胞 AGS human gasic cancer cells F-12+10% FBS
婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-3
人齿根膜韧带成纤维细胞(HPDLF)( 5×105 ) rEPC,大鼠内皮祖细胞-骨髓 Rattus
操作流程:
1. 羟自由基清除能力测试盒100管/96样品牌 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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文献和实验检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。 血浆用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。 细胞培养上清取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去
污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法 ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。4 保温在 ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。ELISA属固相免疫测定,抗原
下一般可保存6个月以上。有些不完整的试盒,仅供应包被用抗原或抗体,检测人员需自行包被。以下简述固相载体和包被过程。3.1.1 固相载体固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作ELISA中载体的材料很多,最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性,加之它的价格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。ELISA载体的形状主要有三种:微量滴定板、小珠和小试管。以微量滴定板最为常用,专用于EILSA的产品称为
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