鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒

 本试剂盒只能用于科 学研究，不得用于医学诊断,具体各指标使用说明书请联系客服索取，本模板为通用模板，仅供参考。 
鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒
试剂盒检测原理： 
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本 抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最 终的黄色。
颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保 存方法
1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何 细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 
3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 
5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20 ℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属 于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不 用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.  浓度为0的 S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实 际浓度。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺 序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。
鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒
试剂盒组成 
名称                   96孔配置      48孔配置     备注
微孔酶标板         12孔×8条     12孔×4条    无
样本稀释液         6mL              3mL           无
检测抗体-HRP    10mL            5mL           无
20×洗涤缓冲液   25mL           15mL          按说明 书进行稀释
底物A                 6mL             3mL            无
底物B                 6mL             3mL            无
终止液                6mL             3mL            无
封板膜                2张               2张             无
说明书                1份               1份             无
自封袋                1个               1个             无
注：标准品浓度都不相同，麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备：
20×洗涤缓冲液的稀 释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液 ，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板 条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准 品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.  样本孔先 加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.  除空白孔 外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔 ，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体 ，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用 洗板机洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育 15min。
7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm 波长处测定各孔的OD值。
结果判断
 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准 品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒
试剂盒性能
1. 准确性：标准品 线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：最低检 测浓度小于（参考说明书）
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反 应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月 
免责声明
1.  试剂盒仅 供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。 
    严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。