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TOP10受体菌
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北京百奥莱博科技有限公司
1ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应TOP10受体菌,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
TOP10受体菌规格:1ml品牌:百奥莱博产地:国产|进口编号:XH045基因型:F-,supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1细胞种类高效常用宿主菌E.coli HB101E.coli HB101在基因重组实验起始时便十分常用。遗传性能稳定,使用十分方便,适合于各种基因重组实验。保存:所有受体菌均为甘油保存,-70℃可长期保存,-20℃可保存一年。TOP10受体菌正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:·载体两性电解质PH4-6编号:XH075规格:12ml别名:两性电解质两性电解质载体(PH4-6):Ampholyte solution、Ampholine。性状;近无色至浅黄色透明液体,有粘性,为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多氨基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。溶度:为40%的溶液用途:用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳储存:充氮密封4℃保存。保持期,两年。开启后请尽快用完。·土壤基因组DNA提取试剂盒编号:XH018规格:50T/200T注:该试剂盒置于室温(15℃-25℃)干燥条件下可保存12个月产品简介:本试剂盒采用独特的缓冲液,尽可能的去除腐殖酸。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤:1,称取土壤样本0.1-0.3g于离心管(强烈建议2ml圆底离心管),加入450ul溶液Ⅰ剧烈震荡混匀1-2min至看不到较大固体块。2,加入50ul溶液Ⅱ颠倒混匀,65℃水浴5min,每2min混匀一次。3,加入100ul溶液Ⅲ颠倒混匀,室温12000rpm离心10min。4,取上清,在上清中加入5ul核酸助沉剂,再加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。4、12000rpm离心5min,弃上清,沉淀加入1ml 70%乙醇,轻轻混匀,再次12000rpm离心5min,弃上清,将离心管在离心机中再次离心30S左右,吸去底部少量液体。5、 室温放置2min左右,等沉淀边缘微微发白,加入50-100ulTE缓冲液溶解,如很难溶解,可55℃水浴5分钟。6、电泳或者其他方法检测,进入下游实验。因为土质千差万别,得到的DNA含量也是相差很大,如果电泳无法检测,可用PCR检测。TOP10受体菌关键词:TOP10受体菌,XH045,百奥莱博·Bradford蛋白浓度测定试剂盒编号:XH067规格:2500微孔本试剂盒自订购之日起九个月内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做2500孔。当使用2ml比色皿时可做250孔,如果是1ml比色皿时可做500孔。产品简介:考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm变为595nm,在一定的浓度范围内,测定的吸光度值A595,与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。操作说明:一,微孔酶标仪法1. 完全溶解蛋白标准品,取10ml,加240ulPBS稀释至250ml ,使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。2. 5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取1ml 5×G250染色液,加入4ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。3. 将标准品按0, 2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中,加PBS稀释液补足到20微升。4. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。5. 各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液,室温放置3-5分钟。6. 用酶标仪测定A595,或560-610nm之间的其它波长的吸光度。7. 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。二,分光光度计法如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。步骤如下:1,取八支(或者更多)干净的10ml离心管,标记上号。2,取100ulBSA,加PBS2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。3,5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀,取10ml 5×G250染色液,加入40ml双蒸水,混匀成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。4,按下表加入试剂(以每孔5ml计,多余的用来润洗比色皿)5,反应3分钟后测OD值。为了实验的准确性,可每间隔2分钟加一管染色液,每间隔2分钟测一管OD值。TOP10受体菌关键词:TOP10受体菌,XH045,百奥莱博·去内毒素质粒DNA提取试剂盒编号:XH012规格:50T/200T原理简介本试剂盒在常规质粒提取试剂盒的基础上改进而来,增加内毒素清步骤,提取的质粒可用于一些要求更高的实验,如转染。本试剂盒(以200T为例)可以用200小次或者10大次提取。注意事项1.溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀,可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。2.溶液Ⅰ中加入RNase 后请放2-8度保存,如果长久不用(如一个月),可-20度冻存,或者按照比较分次加入。3.可根据实验情况中量或者大量提取,加入的试剂等比放大。4.内毒素清除剂在常温下出现面混浊现象,为正常,在2-8℃放置一段时间混浊会消失。5.本试剂盒在去除内毒素的过程中会损失少量质粒,因而相对于常规提取,本试剂盒得率偏低。操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)在溶液Ⅰ中加入RNaseA,混匀,2-8度保存。1.取过夜菌1-5毫升,5000g离心1分钟收集细菌沉淀,弃上清(可重复多次收集于一管中,收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数),如为阳性细菌,可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液,37度处理30分钟,离心,收集沉淀。2.在收集的菌液中,加入200ul溶液I,重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开,无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。3.每管加入200ul溶液Ⅱ(如有沉淀,可37度水浴),轻轻颠倒离心管4-6次,使细菌完全裂解,溶液透明。放置2-3分钟,不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。4.放置2-3分钟后,每管加入200ul溶液III,随即颠倒离心管4-6次混匀,可见白色絮状物产生。5.最高速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。6.将上清转移到新的离心管中,如有沉淀,可再次离心。7.加入上清1/5体积冰预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊,冰浴2min至溶液变清亮。8.37℃水浴2min,不时振荡,溶液又变浑浊。12000rpm室温离心2min,溶液应分为两相,上层水相含质粒DNA,下层油状相含内毒素。9.将含质粒DNA的上层水相转移至新管,弃下层油状相,注意不要吸入油状相。重复抽提三次,即重复步骤7-9三次。10.在得到的上清中加入等体积的结合液,再加入等体积的无水乙醇,混匀(上清:结合液:无水乙醇=1:1:1)11.玻璃奶摇匀。取20ul混匀的玻璃奶加入上面的混合液中,混匀。室温放置5分钟,期间颠倒2次。12.10000转/分钟离心1分钟,倒掉上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。13.室温放置10分钟(如果为大提,请延长放置时间到30分钟,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入30-50ulTE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。14.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
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