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- 百奥莱博
- QN4060-EPO
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
298
- 英文名：
Gelatin Sepharose 4FF
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
4～8℃
- 规格：
25ml
特别提示：包括明胶-琼脂糖凝胶4FF在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：明胶-琼脂糖凝胶4FF
英文名称：Gelatin Sepharose 4FF
产品货号：QN4060
产品规格：25ml
明胶-琼脂糖凝胶4FF是采用溴化*法将明胶耦合到琼脂糖凝胶4FF基质上的一种亲和层析填料。明胶是一种高分子糖蛋白，在多种细胞的表面和许多细胞外液（包括血浆）中都发现了明胶的存在，它可以特异性的结合纤维连接蛋白。明胶琼脂糖凝胶4FF是专为纯化或除去纤维连接蛋白的一种亲和层析填料。
技术参数：
基质：高度交联的4%琼脂糖凝胶
颗粒大小：45～165μm
平均颗粒大小：90μm
配基：牛明胶衍生物
配基密度：每ml填料约5mg明胶
连接化学基团：CNBr
zuì大流速：200cm/h
耐压：0.1MPa
pH稳定性：pH3.0～10.0
化学稳定性：所有常用的水相缓冲液
保存液体：20%乙醇
保存温度：4～8℃
使用方法：
1．准备凝胶
① 让凝胶和所有的试剂达到工作时的温度。
② 配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
③ 明胶琼脂糖凝胶4FF是保存在20%的乙醇溶液中，取适量凝胶，清洗掉20%的乙醇，抽干。用缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。
2．装柱
① 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
② 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
③ 打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
3．平衡让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。
4．上样
① 样品用平衡液配制，常用磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液，浑浊的样品要离心和过滤后上样。
② 一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
5．洗脱明胶-琼脂糖凝胶4FF可以采用不同的方式洗脱纤维连接蛋白：
① 使用含有溴盐的缓冲液，例如溴化钠或溴化钾，并在低于平衡缓冲液pH值的条件下洗脱。一种推荐的洗脱缓冲液是：0.05M的醋酸钠，pH值5.0，含1M的溴化钠或溴化钾。
② 可以在平衡缓冲液中加入8 M的脲，来洗脱吸附在凝胶上的纤维连接蛋白。
③纤维连接蛋白还可以通过在平衡缓冲液中添加精氨酸来进行洗脱。
6．再生根据样品的性质，明胶琼脂糖凝胶4FF可以再生，以达到重复使用的目的。可以采用2～3柱体积的高pH值（0.1M的Tris-HCl，0.5M NaCl，pH值8.5）的缓冲液和低pH值（0.1M NaAC，0.5 M NaCl，pH值 4.5）的缓冲液交替清洗凝胶。一个周期重复3次，然后用3-5倍柱体积的平衡缓冲液平衡，即可进行下次试验。如果在纯化过程中使用了洗涤剂或变性剂（如8 M尿素），那么这些洗涤剂也可以用于洗脱缓冲液中。2.7清洗在一些应用中，像变性的蛋白质或脂类这样的样品，在再生过程没有被洗脱下来，可以通过加入一些洗涤剂，例如：0.1％的Triton X-100，在37℃的条件下洗一会。立即用至少5倍柱体积的结合缓冲重新平衡。2.8储存明胶-琼脂糖凝胶4FF应储存在4～8℃，20%的乙醇溶液中。特别注意：上样之前，样品必须去除色素，否则色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。
除了明胶-琼脂糖凝胶4FF,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| QN3992 | 葡聚糖凝胶LH-60 | 25g|100g|500g |
| QN3994 | 聚酰胺(30～60目) | 500g |
| QN3995 | 聚酰胺(14～30目) | 500g |
| QN4042 | 葡聚糖凝胶G-15 | 25g|100g|500g |
| QN4044 | 镍-琼脂糖凝胶6FF | 5ml|10ml|25ml|100ml |
| QN4049 | 钠型732阳离子交换树脂 | 500g |
| QN4050 | 葡聚糖凝胶G-100 | 25g|100g|500g |
| QN4062 | 苯甲脒-琼脂糖凝胶4FF | 25ml |
| QN4066 | 谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4FF | 10ml |
| QN4071 | 辛基-琼脂糖凝胶CL-4B | 25ml |
| QN4081 | 葡聚糖凝胶G-150 | 25g|100g|500g |
| QN4083 | 琼脂糖凝胶4FF | 100ml|500ml |
| QN4087 | Q-琼脂糖凝胶FF | 100ml |
| QN4095 | 交联琼脂糖凝胶CL-6B | 100ml|500ml |
| QN4096 | 交联琼脂糖凝胶CL-4B | 100ml|500ml |
| QN4097 | 交联琼脂糖凝胶CL-2B | 100ml|500ml |
| QN4108 | 葡聚糖凝胶G-15 | 25g |
| QN4112 | 琼脂糖 | 10g|100g|500g |
| QN4114 | DEAE纤维素DE-52 | 100g |
| QN4115 | 羧甲基纤维素钠CMC(粘度800-1200) | 25g |
| GH1039 | 琼脂糖凝胶4B | 100ml/200ml |
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文献和实验（20 U/μl）、10×酶切缓冲液。 2. 2%的琼脂糖凝胶、5×TAE、 6×上样缓冲液、DNA Marker、溴化乙啶贮存液（10 mg/ml）（EB）。 3. PCR自动热循环仪、紫外透射仪、微量加样器（20 μl、20 0μl）、枪头（20 μl、20 0μl）及离心管(1 ml、0.5 ml)、容器盒、恒温水浴箱、琼脂糖凝胶电泳装置、烧杯、保鲜膜、封口膜、浮漂、微波炉、250 ml 三角烧瓶、透明胶带、托盘天平、台式高速离心机。 三、实验步骤 1. PCR反应
体积的 0.5 M EDTA，以终止消化。然后用等体积酚抽提、等体积氯仿抽提，2.5 倍体积乙醇沉淀，少量 TE 溶解（参见 DNA 提取方法，但离心转速要提高到 12000 g，以防止小片段 DNA 的丢失）。如果需要两种酶消化 DNA，而两种酶的反应条件可以一致，则两种酶可同时进行消化；如果反应条件不一致，则先用需要低离子强度的酶消化，然后补加盐类等物质调高反应体系的离子强度，再加第二种酶进行消化。三、 基因组 DNA 消化产物的琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是目前分离核酸片段最常用的方法，制备
)，按5’→3’方向复制出互补DNA，即引物的延伸阶段。 上述3步为一个循环，即高温变性、低温退火、中温延伸3个阶段。从理论上讲，每经过一个循环，样本中的DNA量应该增加一倍，新形成的链又可成为新一轮循环的模板，经过25-30个循环后DNA可扩增106-109倍。 [实验仪器与设备] 1.PCR基因扩增仪 2.琼脂糖凝胶电泳系统 [实验材料] 1. DNA模板 2. 4种dNTP 3. 引物1和引物2 4. Taq
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