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规格:5000U
编号:BTN120412
产地:国产|进口
英文名:Micrococcal Nuclease
品牌:百奥莱博
产品简介:
Micrococcal Nuclease(微球菌核酸酶)是一种内切核酸酶,作用于单链及双链核酸,生成3′磷酸末端。对单链核酸的作用较好,能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+,其催化作用需要Ca2+的存在。 本酶主要用作:
1. 细胞粗抽提液中核酸的水解。
2. 为制备核小体(Nucleosome)时消化分解染色质(Chromatin)。
纯度:
1. 50 U的本酶和1μg的λDNA在Mg 存在下,37℃反应10分钟,DNA的电泳谱带不发生变化。
2. SDS-PAGE: >95%。
使用及效果:
DNA的片段化
1. 在微量离心管中配制下列反应液。
DNA 100μg
10×Buffer 5 μl
Micrococcal Nuclease 2U
dH2O up to 50 μl
2. 37℃反应数分钟(通过预实验确定具体反应时间)。
3. 加入5 μl的 200 mM EGTA(或 EDTA)停止反应。
4. 加入5 μl(1/10量)的 3 M NaOAC(pH5.2)。
5. 加入125 μl( 2.5倍量)的冷无水乙醇,-20℃放置30~60分钟。
6. 离心回收沉淀,用70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
备注:
本酶的活性严格依赖于Ca2+的存在,用EDTA或EGTA可以终止反应。微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ) ,是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到,可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内,微球菌核酸酶均有活性,无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物,其最适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA和RNA底物产生带有 3" 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。
活性单位定义:
以热变性小牛胸腺DNA作底物,在37℃、pH8.0的条件下,30分钟生成1OD260的酸可溶性物质所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
Buffer成分:
储存Buffer:Tris-HCl(pH8.0)50mM,NaCl50mM,DTT1mM,Glycerol50%。
反应Buffer,10×:Tris-HCl(pH8.0)200mM,NaCl50mM,CaCl225mM。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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微球菌核酸酶关键词:微球菌核酸酶,BTN120412,百奥莱博
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·二氯异香豆素溶液
编号:BTN130540
英文名称:Dichloroisocoumarin Solution
规格:10mL
产品简介:
二氯异香豆素( 3,4-Dichloro-2-benzopyran-1-one;3,4-DCI),分子量是215.0,溶于DMF。它可以抑制大部分丝氨酸蛋白,如,弹性蛋白酶,组织蛋白酶G,胞内蛋白酶Glu-C等,不能抑制木瓜蛋白酶、β-内酰胺酶和白氨酸氨基肽酶。本产品为10mg/mL的DMF溶液,工作浓度为1-43μg/mL。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·山羊抗兔IgG,异硫氰酸荧光素标记
编号:BTN131156
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG ,FITC Conjugate
规格:0.1mg
产品简介:
本产品是山羊抗兔IgG二抗,浓度为0.5mg/mL,是经亲和纯化并标记有异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate,FITC)。FITC为一种常用的荧光染料,最大吸收光谱为492nm,最大发射光谱为520nm,经本荧光抗体染色的标本,在荧光显微镜下观察呈现明亮的绿色荧光。本抗体与所有的IgG 亚类反应,特异识别兔IgG,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG 无明显交叉反应,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。
运输及保存:
低温运输,4℃保存,有效期一年。避免长时间暴露于光线下,请勿冷冻。
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