柱式血液DNA提取试剂盒

特别提示：包括柱式血液DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：柱式血液DNA提取试剂盒
英文名称：Blood DNA column extraction kit
产品货号：BTN60306
产品规格：50次

本试剂盒是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。

产品特点：
1. DNA纯净，OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2.产量高，一般为1-10μg/mL全血(对哺乳动物血液)。
3. 操作简单，整个过程约20分钟，全室温操作，适合大规模样品处理。
4. 用量广泛，每次可以处理少达20μl(对禽类动物血液)，多达1mL的血液(对哺乳动物血液)。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

试剂盒组成：

成分	规格
红细胞裂解液(A型)	25ml
溶液A	25ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在0.02-1mL新鲜或抗凝血液(冷冻血需先37℃水浴融化)中加入0.5mL红细胞裂解液(A型)，吹打混匀。
a)哺乳动物，血液使用量以300μl以下为宜，使用量越大产量越高，但产率会降低。如果血液多于300μl，重复1-2步两次可以提高产率。
b)禽类动物，血液使用量以20μl以下为宜，可以从第3步做起。
2.室温12000～15000rpm离心5分钟，沉淀呈粉红色，小心倾去上清。
3. 再短暂离心半分钟，吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解，但一般可以省略。
4. 向有沉淀的离心管内加入0.5mL溶液A(溶液A有少量晶体沉淀，用前需要摇晃均匀)，用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞，释放DNA，所以吹打越充分越好。
5. 静置2分钟待溶液变清亮后，将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟，以使DNA与膜充分结合。
6. 12000rpm离心半分钟，DNA将吸附到膜上，弃收集管中的废液。
7. 加入0.7mL的通用洗柱液，12000rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。
8. 加入0.3mL的通用洗柱液，12000rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。
9. 12000rpm离心半分钟，甩干残留液体。此步很重要，以去除膜上残留通用洗柱液，否则会影响后续反应。
10. 将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管(自备)中，加入适量50μl DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA洗脱液2.0在65℃预热后再使用，洗脱DNA的效果会更好。
11. 12000rpm离心半分钟，离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。

除了柱式血液DNA提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：红细胞裂解液A型(核酸纯化)
货号：BTN60403
规格：250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份，不含DNA和RNA，其所含血红素能抑制PCR反应，所以先用本产品裂解红细胞，再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。

产品特点：
1.快速，一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/*仿去蛋白质。
2.高效，一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞，一般样品zuì多只需要处理两次。
3.扩容性好，可以一次处理多达几十毫升的样品，也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在装有抗凝血液的离心管中，按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟，小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中，轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞，可以直接用于后续的实验。

名称：一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒
货号：BTN80101
规格：50次
本试剂盒是整合一管式病毒DNA提取试剂盒和一管式病毒RNA提取试剂盒两产品而得，专门用于从血清(血浆)等液体样品中同时提取病毒DNA(如HBV DNA)和病毒RNA(如HCV RNA和HIV RNA)的产品。本产品灵敏度高，稳定性好，使用简单快捷，尤其适合于整合到临床PCR或RT-PCR 检测试剂盒中。

试剂盒特点：
1. 回收率高，可以达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。可以跟QIAGEN的同类产品媲美。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到病毒DNA的zuì终灵敏度可以达到30 拷贝/mL样品，通过RT-PCR 检测到病毒RNA的zuì终灵敏度可以达到50 拷贝/mL样品。
3.一管式操作，减少了样品污染的可能。
4.一站式套装，除样品外客户不需要准备任何试剂，降低了实验误差。
5. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
6.处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，zuì多可以处理1.5mL液体病毒样品。
7.与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	40ml
溶液C	50ml
溶液D	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，溶液A4℃保存，溶液B和溶液C室温保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

使用方法：
1. 将0.1-0.2mL液体样品转移到1.5mL 旋盖离心管中。如果需要富集样品中的病毒，可以先将1.5mL液体样品转移到1.5mL 旋盖离心管中,然后4℃ 24,000 g离心60分钟，移弃1.3mL上清液后继续操作下一步的操作。
2. 加入0.6mL溶液A，盖上盖子后振荡3-5秒。
 注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。
3.室温静置10分钟。
4. 加入0.6mL溶液B，盖上盖子后振荡3-5秒。
5. 15000g室温离心15分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。
6.小心移弃上清。注意不要触及管底的DNA和RNA沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
8. 移弃上清，注意不要触及管底的DNA和RNA沉淀。
9. 短暂离心数秒，注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
10.小心移弃残留上清(残留的溶液C会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀。
11. 加入100-200μl溶液D，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有DNA和RNA，必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
12. 直接取适量样品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

使用效果：
DNA病毒：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl进行荧光PCR(使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。
RNA病毒：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl进行荧光PCR(使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。
图注：用本产品和市场上进口Q公司同类产品分别提取0.2mL培养的B型流感病毒上清液(含1000 拷贝/mL 病毒)，RNA 溶于200μl溶液D中，取10μl进行荧光PCR(50μl 体系，使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红线表示本产品，蓝线表示进口的Q公司同类产品。

疑难解答：
Q：样品中如果同时有RNA和DNA，DNA 会对RNA的RT-PCR 克隆产生干扰吗？
A：不会。病毒一般或者只含RNA，或者只含DNA，如果样品中正好同时含有DNA 病毒和RNA 病毒，但由于两者之间没有同源性，所以DNA 也不会干扰RNA的RT-PCR扩增。这跟组织细胞中提出的核酸样品不一样，因为后者的DNA和RNA是同源的，即任何RNA分子都有与之同源的DNA分子，所以如果同时存在，DNA 也会在RT-PCR时跟引物结合，产生扩增。干扰RT-PCR。