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- 2025年07月07日
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39
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详见说明书
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上海抚生
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低温冷藏
- 规格：
9ml*20
英文名称：
产品规格：9ml*20
产品用途：主要用于含有氯、碘消毒剂样品的增菌培养【用途】主要用于含有氯、碘消毒剂样品的增菌培养。【检验原理】蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；硫代硫酸钠中和消毒剂中的氯和碘。【主要组成成份】蛋白胨、氯化钠、硫代硫酸钠。【适用仪器】适用实验室配套仪器。【样本要求】样本的收集、储存、处理、运输应严格执行无菌操作，避免污染，【参考值（参考范围）】本品的空白对照应无菌生长。【检验结果的解释】培养物有微生物生长，应根据菌落特征判定，如菌落特征不明显
产品图片：
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操作步骤：
1、氯、碘中和剂管价格按、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液；
2、取 25 克样品液加入 225ml mEC 肉汤或 mTSB 肉汤中， 37 ℃ 增菌培养 18-24 小时；
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液，划线接种到 O157 菌显色培养基上，做 2 个平板；
4 、 37 ℃培养 18-24h ， O157:H7 菌显紫色 ， 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色， 其它细菌显黄色或无色；
5 、对典型菌落可做 O157:H7 菌血清学试验和全套生化试验。
菌液制备与稀释：
1.氯、碘中和剂管价格金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌
挑取四代以内（含四代）上述菌种的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中，30～35℃培养18～24h，使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-6～10-7、枯草芽孢杆菌10-5～10-6)
2. 白色念珠菌
挑取四代以内（含四代）的白色念珠菌新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中，经20～25℃培养2～3天；使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-6～10-7)
3. 黑曲霉
挑取四代以内（含四代）的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基斜面中，经20～25℃培养5～7天（生长大量黑色菌丝）,加入5ml含0.05%聚山梨脂80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，将孢子洗脱。使用含0.05%聚山梨脂80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或含0.05%聚山梨脂80的0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释，制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度：通常情况下为10-5～10-6，因菌丝数量不同，可能有误差)
培养基制备：
被检培养基：称取培养基30.0g于1000ml纯化水中,微温溶解，分装试管，121℃高压灭菌15分钟,冷却，备用。
另准备胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基进行稀释菌悬液计数，培养基灭菌后置于44.5℃水浴保温待用。
氯、碘中和剂管价格【实验方法】
1. 培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4. 培养条件：
无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
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文献和实验氯胺T法标记效率高、重复性好、试剂便宜易得，是目前使用最多的碘标记方法。 1 ．原理氯氨 —T （ Chloramine--T ）是一种温和的氧化剂，在水溶液中产生次氯酸，可使碘阴离子氧化 成碘分子。这活性碘可取代肽链上酪氨酸苯环上羟基位的一个或两个氢，使之成为含有放射性碘化酪氨酸的多肽链。 2．方法以 125 I—AVP的制备为例
。 5.使用抗体溶液PBS 或其他缓冲液透析，以去除未结合的生物素。由于生物素分子较大，透析比预期的要慢，或使用蛋白质A或蛋白G层析柱再次纯化抗体。 6.标记抗体按纯化抗体的储存方法保存。 放射性碘标记抗体 蛋白质的碘标记方法有很多种，比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。 操作步骤 1.在碘标记前，准备氯甘脲包试管（2支6mm碱性玻璃管或1.5ml锥形试管)。氯甘脲溶于浓度0.5μg/ml的氯仿中。然后将其分别加入试管管100μl和20μl。让氯仿在通风柜中挥发
含还原剂（如Na2 S2 O5 等）量多时，会抵消氯胺T的作用，降低碘利用率，甚至导致标记完全失败。放射性碘源要用无载体的，标记所用全部用具和试剂必须不含碘；只要有极少量的碘的污染，非放射性碘就会稀释放射性碘，使放射性碘利用率显著降低。为了便于放射性防护和除污染，以及减少射线对蛋白质分子的损伤，标记投入的放射碘量不宜过大，一般以 （2）放射性碘与多肽、蛋白质用量的比例：这比例对标记结果的影响很大。如上述原因，一般标记时放射性投入量不宜过多，示踪实验室中常规每次只用1～2mCi
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