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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
300
- 供应商:
深圳市康初源有限公司
- 现货状态:
现货
- 规格:
5m/卷
技术参数:
l PH稳定范围:5-9;
l 污染物水平:硫化物少于0.3%,重金属少于50ppm;
l 化学兼容性:与很多盐兼容,还可以与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容;
l 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌;
l 蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1ng。
使用前处理:
为防干裂,透析袋出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
方法一:
1、 把透析袋剪成适当长度(10-500px)的小段。
2、 在大体积(500mL)的2%(W/V)的碳酸氢钠和1mmol/L EDTA.2Na (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
3、 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4、 放在500mL的1 mmol/L EDTA.2Na (pH=8.0)中将之煮沸10min。
5、 冷却后,置于30%或者50%的酒精中,放于4℃冰箱,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋必须戴手套。
6、 在使用前要用蒸馏水将透析袋里外清洗干净。
说明:EDTA煮主要是为了除去生产时附着在透析袋上的金属离子。
说明:透析液的配置:10g NaHCO3 + 186.6mg EDTA.2Na + 500mL蒸馏水
1 mmol/L EDTA.2Na:即373.2mg/L
方法二(实验要求不高时可以使用):
可用沸水煮5至10分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
使用方法:
使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。为了加快透析速度,除多次更换透析外,还可使用磁力搅拌器搅拌。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
使用后透析袋的保存方法:
1.用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置于50%乙醇中保存即可;
2.用完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以选择在1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存!
3.使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水或者30%乙醇中,确保透析袋始终浸没在溶液内。若长时间不用,可加少NaN2,以防长菌。从此时起取用透析袋必须戴手套。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复用。




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文献和实验铵溶液,边滴加边摇匀,然后置于2到8摄氏度静置2小时。 将步骤e中的待分离物于离心机内离心,8000r/min离心15到20分钟,除上清。 将步骤f中离心后的沉淀用1ml 0.01M PBS 溶解, 转移到MD 14000透析袋内,用0.01 M PBS进行透析,透析4次以上,每次至少1小时以上。 2.正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法该纯化方法原理是:正辛酸在偏酸条件下,能与抗血清中或者小鼠腹水中的杂蛋白结合,在等电点附近将其沉淀,IgG类抗体则存在于上清液中,再利用饱和硫酸铵沉淀法即可进一步提纯。 具体
. Polybrene (sigma),10 mg/ml; 11. 透析袋:Spectrum Co. (成卷供应,带少量甘油,硫化物与重金属),MW=8000~14400; 12. 灭菌甘油。 三、操作流程: 1. 293 细胞(E1-transformed human embryonic kidney cells 在转染前24 小时接种于1 或2 个60 mm 培养盘中,使之在转染时细胞汇合率为50-70%; 2. 在转染前,用Pac I 处理目的质粒(一般一个60 mm 细胞盘
。一.从1ml全血或体液中提取DNA的步骤:⑴ 裂解1: 取1ml全血,血桨,血清,淋巴细胞放入到1.5ml的离心管中,加入400μl裂解液1。上下翻转,使沉淀物分散,旋转脉动15秒后放入离心机中离心,离心速率为8000rpm,1min.。倒掉上层液,可见离心管底部有血色沉淀。重复此裂解步骤一次,这次是加入1ml裂解液1。 最后用移液管吸净所有上层液弃去, 以使离心管底部的血色沉淀不再残留有裂解液1。⑵ 裂解2: 在上面离心管中加入1ml裂解液2。上下翻转,务必使沉淀物分散, 旋转脉动15秒后放
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