- ¥7260
- 康朗生物
- KLH1081
- 上海
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
原代细胞
- 细胞类型：
见说明书
- 肿瘤类型：
见文献
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 库存：
5×105
- 生长状态：
良好
- 年限：
永久
- 运输方式：
新鲜/干冰
- 器官来源：
骨骼
- 是否是肿瘤细胞：
见文献
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
见文献
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
见文献
- 组织来源：
骨骼
- 规格：
5×105
细胞简介：
树突状细胞（Dendritic cells, DC）是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cells, APC)，它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。树突状细胞起源于造血干细胞，DC的来源有两条途径：①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC，称为髓样DC(myeloid dendritic cells，MDC)，也称DCl，与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞；包括朗格汉斯细胞（Langerhans cells ，LCs），间皮（或真皮）DCs以及单核细胞衍生的DCs等②来源于淋巴样干细胞，称为淋巴样DC(Lymophoid dendritic cells，LDC)或浆细胞样DC(plasmacytoid dendritic cells，piX；)，即DC2，与T细胞和NK细胞有共同的前体细胞。
本公司生产的人骨髓树突状细胞采用体外诱导和密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息：
我们推荐使用康朗生物研制的人骨髓树突状细胞专用完全培养液（产品编号：KLH4081-5）作为体外培养人骨髓树突状细胞的培养基。
细胞培养过程中，传代是非常重要的环节，若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害，原代细胞因其培养难度高且传代次数有限，细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验，总结出一套细胞消化的方法，有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家：1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。
8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验tigerbin 请教各位大侠： 有没有研究microRNA与树突状细胞免疫功能方面的？现在microRNA的研究已经遍及肿瘤，免疫，心血管疾病，病毒等，如miR-155,有关它与免疫的研究，本人看的几篇文献主要是利用转基因技术敲除小鼠体内Bic基因（miR-155系BIC基因的表达产物，产生于活化的B细胞、T细胞、巨噬细胞、树突状细胞等），检测bic／miR-155-/-小鼠B,T,DC细胞分化，成熟，活化情况，及功能改变等。 miR-155
树突状细胞培养操作步骤 准备补充剂 将补充剂混合物在 15~25℃ 解冻。在无菌条件下用移液枪小心地将补充剂混合物混匀。然后，把补充剂混合物全部加到基础培养基中。盖上瓶子，轻轻混匀直到形成均一的混合物。DC生成培养基所附带的相应的细胞因子组合包含有成分A和B，它们都是以100X 的原液状态运输的。 注意：此时不要将化合物B加入培养基中。 DC基础培养基不带细胞因子，因此使用时必须另外自行添加。 新鲜分离的单核 DC 细胞的传代 对于新鲜分离自外
树突状细胞免疫治疗 DC能直接摄取、加工和提呈抗原，刺激体内初始T细胞活化；通过直接或间接的方式促进B细胞增殖，调节体液免疫应答；并可刺激记忆丁细胞，诱导再次免疫应答。DC可促进或抑制免疫应答的发生。研究DC的免疫调节功能对于治疗肿瘤、自身免疫病以及控制移植排斥反应具有重要的应用意义。 DC生物治疗主要包括运用趋化因子、细胞因子、CD40L、TLR配体以及能与CDld分子结合的半乳糖基神经酰眩
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