- ¥7260
- 康朗生物
- KLH1079
- 上海
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
原代细胞
- 细胞类型：
见说明书
- 肿瘤类型：
见文献
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 库存：
5×105
- 生长状态：
良好
- 年限：
永久
- 运输方式：
新鲜/干冰
- 器官来源：
骨骼
- 是否是肿瘤细胞：
见文献
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
见文献
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
见文献
- 组织来源：
骨骼
- 规格：
5×105
细胞简介：
内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells, EPCs)是血管内皮细胞的前体细胞，亦称为成血管细胞(Angioblast)，在生理或病理因素刺激下，可从骨髓动员到外周血参与损伤血管的修复。EPCs是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构。其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。内皮祖细胞取材方便，在血管再生和心血管疾病的细胞治疗和基因治疗中具有广阔的应用前景。
本公司生产的人骨髓内皮祖细胞采用密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，CD34、CD133及VEGFR2呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息：
我们推荐使用康朗生物研制的人骨髓内皮祖细胞专用完全培养液（产品编号：KLH4079-5）作为体外培养人骨髓内皮祖细胞的培养基。
细胞培养过程中，传代是非常重要的环节，若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害，原代细胞因其培养难度高且传代次数有限，细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验，总结出一套细胞消化的方法，有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家：1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。
8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验hql219 HS-5细胞有谁养过，传代时大概需要消化多长时间，几天传一代？ ysgoodluck 楼主，你养的HS-5是用的什么培养基啊？ wjling2550 我前段时间养过，刚开始差不多三四天、四五天传一代，消化的时候也好消化，大约3分钟吧，后来就长得比较慢了，有一次是一周多才传一代 wjling2550 培养基用的是H-DMEM
ml离心管内,带至实验室。（1）原代培养：将所获得的健康成人骨髓3～5ml,100目钢网过滤后,平头吸管反复抽吸吹打制成单细胞悬液,采用全骨髓培养法以1×10 6 /ml置于50ml培养瓶中培养,每瓶含10ml培养液(含青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml,15%胎牛血清,普通低糖DMEM),置于37℃、5%CO 2 湿化空气的孵箱中进行原代培养。48ｈ后半量换液,以后每48～72ｈ全量换液。（2）传代培养：原代培养至第10～12ｄ,细胞汇合成单层,用无血
一、实验器材及试剂1、 实验器材名称脱水机包埋机病理切片机冻台组织摊片机烤箱载玻片及盖玻片2、 主要实验试剂试剂厂家货号无水乙醇国药集团化学试剂有限公司二甲苯国药集团化学试剂有限公司中性树胶国药集团化学试剂有限公司CD105 抗体AbcamAb11414BMPR1aAbcamAb38560二、组织石蜡包埋切片实验步骤1、取材：新鲜组织固定于 4% 多聚甲醛 24 h 以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。2、脱水：将脱水盒放进
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