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人肾小球上皮细胞

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  • ¥8560
  • 康朗生物
  • KLH1049
  • 上海
  • 2025年07月14日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 品系

      原代细胞

    • 细胞类型

      见说明书

    • 肿瘤类型

      见文献

    • 供应商

      上海康朗生物科技有限公司

    • 库存

      5×105

    • 生长状态

      良好

    • 年限

      永久

    • 运输方式

      新鲜/干冰

    • 器官来源

      泌尿系统

    • 是否是肿瘤细胞

      见文献

    • 细胞形态

      正常

    • 免疫类型

      见文献

    • 物种来源

    • 相关疾病

      见文献

    • 组织来源

      泌尿系统

    • 规格

      5×105

    人肾小球上皮细胞
    细胞简介:

    肾小球是血液过滤器,肾小球毛细血管壁构成过滤膜。肾小球外层为上皮细胞层上皮细胞又称足细胞,其不规则突起称足突,其间有许多狭小间隙,血液经滤膜过滤后,滤液入肾小球囊。在正常情况下,血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中,仅小分子物质如尿素、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过。

    本公司生产的人肾小球上皮细胞采用酶解法制备而来,细胞总量约为5×105/T25方瓶,CK-18、CK-19呈阳性,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

    培养基信息:

    我们推荐使用康朗生物研制的人肾小球上皮细胞专用完全培养液(产品编号:KLH4049-5)作为体外培养人肾小球上皮细胞的培养基。

    细胞培养过程中,传代是非常重要的环节,若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害,原代细胞因其培养难度高且传代次数有限,细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验,总结出一套细胞消化的方法,有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家:

    1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
    2. 提前准备好多聚赖氨酸(PLL,货号KL0403)或纤维粘连蛋白(BPF,货号KL8248)包被好的培养瓶。
    3. 将完全培养基,胰酶/EDTA消化液(T/E,货号KL0103),胰胰中和液(TNS,货号KL0113)和不含钙镁离子的DPBS(货号KL0303)加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
    4. DPBS冲洗细胞。
    5. T-75培养瓶为例,向培养瓶中加入8mlDPBS,然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
    6. 在消化期间,准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清(FBS,货号KL0500)。
    7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中(一小部分细胞已消化下来),将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟(此时培养瓶中没有液体)。
    8. 在孵化结束时,轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
    9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液,将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶,以保证所有细胞被收集。
    10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功,细胞数量应小于5%
    11. 1000/分离心收取的细胞悬液5分钟,然后在培养基中重悬细胞。
    12. 细胞计数,然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
    原代细胞、细胞系与细胞株的区别

    产品细节图片1
    与细胞系相反,原代细胞是非常敏感的细胞,需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长,需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如,内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别,因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分,以支持细胞的生长。但对于原代细胞,高血清水平可导致细胞分化,或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
     

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