- ¥9660
- 康朗生物
- KL1002
- 上海
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
原代细胞
- 细胞类型：
见说明书
- 肿瘤类型：
见文献
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 库存：
5×105
- 生长状态：
良好
- 年限：
永久
- 运输方式：
新鲜/干冰
- 器官来源：
肝脏
- 是否是肿瘤细胞：
见文献
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
见文献
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
见文献
- 组织来源：
肝脏
- 规格：
5×105
细胞简介：
在人体正常生理和病理条件下，肝脏在能量代谢、外源物质的生物转化、基质蛋白的合成、解毒等方面发挥着极其重要的作用。肝实质细胞是指具有肝功能的基本组成单位，大约占肝脏体积及数量的80%左右，肝实质细胞具有多方面的功能，例如：蛋白质的合成和储存、分泌胆汁和解毒物质等。肝实质细胞体外常常被用作研究肝脏功能、能量代谢和肝脏疾病的良好模型。
本公司生产的人肝实质细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，albumin、cytokeratin-18、vimentin呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息：
我们推荐使用康朗生物研制的人肝实质细胞专用完全培养液（产品编号：KLH4001-5）作为体外培养人肝实质细胞的培养基。
细胞培养过程中，传代是非常重要的环节，若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害，原代细胞因其培养难度高且传代次数有限，细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验，总结出一套细胞消化的方法，有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家：1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。
8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验材料 相差显微镜，荧光显微镜，手术器械，雄性SD大鼠，体重250-450 g，戊巴比妥钠，200目尼龙网，小牛血清（或胎牛血清，则更好），DMEM，胰酶消化液（以HBSS配），Nycodenz（以GBSS配），D-Hanks'（KCl 0.4 g/L，KH2PO4 0.06 g/L，NaCl 8.0 g/L，NaHCO3 0.35 g/L，Na2HPO4.7H2O 0.06 g/L或Na2HPO4 0.053 g/L，可加酚红 0.02 g
Stem Cell Rep：北大向宽辉/时艳/李彤等利用干细胞分化技术建立静息态肝星状细胞，可体外模拟早期肝纤维化过程
肝纤维化主要是肝脏慢性炎症导致肝脏损伤，肝脏结缔组织异常增生而引起的一种病变，病情会进一步发展为肝硬化甚至肝癌。肝纤维化病因可由病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病、药物性肝损伤、及自身免疫性肝病等引起。 肝星状细胞（Hepatic Stellate Cells, HSCs）的活化是肝纤维化的重要病变机制之一，在肝纤维化早期分泌胶原并介导血管形成。HSCs 是肝脏内具有重要生理和病生理功能的一种细胞类型。在生理情况下，静息状态的 HSC 负责维持细胞外基质的稳态和以脂滴形式贮存维生
【摘要】 目的：探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对肝星状细胞(hepatic stellate cell HSC)合成细胞外基质(extracellular matrix ECM)的影响。 方法：剂量效应组分别用含HMGB1 0 mg/L,0.1 mg/L,1.0 mg/L,10 mg/L，20 mg/L和40 mg/L的HMGB1培养液培养HSC-T6 6 h；时间效应组以含有10 mg/L HMGB1的培养液培养0 h、6 h、12 h、18 h和24 h,对照组以不含HMGB
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