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- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
49
- 英文名：
Mannheimia varigena
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
详见说明书
操作方法
1直接测定
2测定准备
3背景对照测定
4样品活性测定
5计算样品活性
Mannheimia varigena异源曼氏杆菌PCR试剂盒规格样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
Mannheimia varigena异源曼氏杆菌PCR试剂盒规格15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶标板：用于比色的容器
分光光度仪：用于比色分析
酶标仪：用于微量样品比色分析
储存条件
14℃或－20℃
Mannheimia varigena异源曼氏杆菌PCR试剂盒规格准备物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀释液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
产品说明书 1份
Mannheimia varigena异源曼氏杆菌PCR试剂盒规格其他备注
1．本产品为50次操作
2．操作时，须戴手套
3．操作时，避免污染母液
4．即刻进行荧光检测分析
5．本产品染色剂不易洗掉，染色持久
6．本公司提供系列试剂产品
使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1. Mannheimia varigena异源曼氏杆菌PCR试剂盒规格样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。
2.加样（样本处理区）
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。
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文献和实验(1 ,2 ) while A. suis, H. somnus , and Mannheimia hemolytica are considered as potential animal pathogens. The pathogenic potential is incompletely known for most taxa, probably due to limitations in their classification and identification, and inappropriate detection
6-4-3 目前常见微生物鉴定系统 生产厂商 系统名称 可鉴定的微生物 孵育时间及条件 ANI 厌氧菌 ４h；需氧 API20A 厌氧菌 2４h；厌氧 API An-IDENT 厌氧菌 ４h；需氧 API Staph（STAPH－Trac） 葡萄球菌、微球菌 2４h GPI 革兰阳性球菌和杆菌 2~15h ID32 Staph 葡萄球菌 24h API Coryne(Rapid CORYNE) 棒状杆菌及相关菌 24h API 20Strep(Rapid
细胞接毒后出现病变的） 针对JEV细胞总RNA的抽提法： BHK21细胞长成单层后，接毒0.5-1ml（采用大瓶），37℃吸附1h，倒掉，加维持液（含2%的血清和HEPE8的MEM）约5ml，维持天。出 现75%-100%的病变时，以PBS（预冷）冲洗细胞两次，直接在细胞瓶中加入Trizol试剂1ml/10cm2，吹吸几次，以裂解细胞（细胞瓶有两 种常用规格：大的约45cm2，小的约30cm2，故所用Trizol试剂分别约为4.5ml和3ml。Trizol试剂的加入是依细胞瓶而定，以盖满瓶 底为度
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