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- 2025年07月14日
- 产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名：
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书
- 抗体英文名：
Anti-phospho-ZAP70 (Tyr292)
- 靶点：
详见说明书
- 浓度：
1mg/1ml
- 应用范围：
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
- 宿主：
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- 供应商：
上海一研
- 库存：
36
- 级别：
详见说明书
- 目录编号：
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- 抗原来源：
Rabbit
- 保质期：
详见说明书
- 适应物种：
详见说明书
- 标记物：
详见说明书
- 克隆性：
多克隆
- 保存条件：
Store at -20 °C
- 形态：
详见说明书
- 亚型：
IgG
- 免疫原：
KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Zap-70 around the phosphorylation site of Tyr292
- 规格：
0.1ml/100μg
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书英文名称 Anti-phospho-ZAP70 (Tyr292)
中文名称 磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书
别 名 ZAP70 (phospho Y292); ZAP70 (phospho Tyr292); p-Zap-70(Tyr292); p-Zap-70(Y292); p-ZAP70 (Y292); p-ZAP70 (Tyr292); ZAP-70; ZAP 70; ZAP70; zeta-associated protein 70; ZAP-70=protein tyrosine kinase Syk homolog {SH2-like and C-terminal kinase domains}; Tyrosine-protein kinase ZAP-70; 70 kDa zeta-associated protein; Syk-related tyrosine kinase. SRK; STD; TZK; ZAP70_HUMAN; Tyrosine-protein kinase ZAP-70; 70 kDa zeta-chain associated protein.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶 t-淋巴细胞
蛋白分子量 predicted molecular weight：
68kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Zap-70 around the phosphorylation site of Tyr292
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
（石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 This gene encodes an enzyme belonging to the protein tyrosine kinase family, and it plays a role in T-cell development and lymphocyte activation. This enzyme, which is phosphorylated on tyrosine residues upon T-cell antigen receptor (TCR) stimulation, functions in the initial step of TCR-mediated signal transduction in combination with the Src family kinases, Lck and Fyn. This enzyme is also essential for thymocyte development. Mutations in this gene cause selective T-cell defect, a severe combined immunodeficiency disease characterized by a selective absence of CD8-positive T-cells. Two transcript variants that encode different isoforms have been found for this gene. [provided by RefSeq, Jul 2008].
Function : Tyrosine kinase that plays an essential role in regulation of the adaptive immune response. Regulates motility, adhesion and cytokine expression of mature T-cells, as well as thymocyte development. Contributes also to the development and activation of primary B-lymphocytes. When antigen presenting cells (APC) activate T-cell receptor (TCR), a serie of phosphorylations lead to the recruitment of ZAP70 to the doubly phosphorylated TCR component CD247/CD3Z through ITAM motif at the plasma membrane. This recruitment serves to localization to the stimulated TCR and to relieve its autoinhibited conformation. Release of ZAP70 active conformation is further stabilized by phosphorylation mediated by LCK. Subsequently, ZAP70 phosphorylates at least 2 essential adapter proteins: LAT and LCP2. In turn, a large number of signaling molecules are recruited and ultimately lead to lymphokine production, T-cell proliferation and differentiation. Furthermore, ZAP70 controls cytoskeleton modifications, adhesion and mobility of T-lymphocytes, thus ensuring correct delivery of effectors to the APC. ZAP70 is also required for TCR-CD247/CD3Z internalization and degradation through interaction with the E3 ubiquitin-protein ligase CBL and adapter proteins SLA and SLA2. Thus, ZAP70 regulates both T-cell activation switch on and switch off by modulating TCR expression at the T-cell surface. During thymocyte development, ZAP70 promotes survival and cell-cycle progression of developing thymocytes before positive selection (when cells are still CD4/CD8 double negative). Additionally, ZAP70-dependent signaling pathway may also contribute to primary B-cells formation and activation through B-cell receptor (BCR).
Subunit ：
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书技术外包服务:
★分子生物学：质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物学：基因合成、引物合成、基因测序、载体构建等
★蛋白工程：原核、哺乳动物蛋白表达系统等
★病毒包装：腺病毒、慢病毒等
★抗体工程：磁珠分选、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等
★细胞工程：细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)、细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术等等。
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
绵羊白介素2(IL-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人脂多糖结合蛋白(LBP)免疫试剂盒 Human LBP ELISA Kit
淋巴毒素α(LTA)ELISA试剂盒 ，英文名： LTA ELISA Kit
RatCaspase-9,Casp-9ELISA试剂盒大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISA试剂盒人协同刺激分子受体(CMR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Humanfreefattyacids，FFAELISAKit人游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书大鼠基质金属蛋白酶13 英文名称： maix metalloproteinase 13 规格： 48T/96T 英文缩写： MMP-13
大鼠β2-微球蛋白 英文名称： β2-microglobulin 规格： 48T/96T 英文缩写： β2-MG
大鼠MK 英文名称： Midkine 规格： 48T/96T 英文缩写： Midkine
大鼠N端脑钠素前体 英文名称： Rat N.Terminal proBrain Naiu
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
中文名称 磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书
别 名 ZAP70 (phospho Y292); ZAP70 (phospho Tyr292); p-Zap-70(Tyr292); p-Zap-70(Y292); p-ZAP70 (Y292); p-ZAP70 (Tyr292); ZAP-70; ZAP 70; ZAP70; zeta-associated protein 70; ZAP-70=protein tyrosine kinase Syk homolog {SH2-like and C-terminal kinase domains}; Tyrosine-protein kinase ZAP-70; 70 kDa zeta-associated protein; Syk-related tyrosine kinase. SRK; STD; TZK; ZAP70_HUMAN; Tyrosine-protein kinase ZAP-70; 70 kDa zeta-chain associated protein.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶 t-淋巴细胞
蛋白分子量 predicted molecular weight：
68kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Zap-70 around the phosphorylation site of Tyr292
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
（石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 This gene encodes an enzyme belonging to the protein tyrosine kinase family, and it plays a role in T-cell development and lymphocyte activation. This enzyme, which is phosphorylated on tyrosine residues upon T-cell antigen receptor (TCR) stimulation, functions in the initial step of TCR-mediated signal transduction in combination with the Src family kinases, Lck and Fyn. This enzyme is also essential for thymocyte development. Mutations in this gene cause selective T-cell defect, a severe combined immunodeficiency disease characterized by a selective absence of CD8-positive T-cells. Two transcript variants that encode different isoforms have been found for this gene. [provided by RefSeq, Jul 2008].
Function : Tyrosine kinase that plays an essential role in regulation of the adaptive immune response. Regulates motility, adhesion and cytokine expression of mature T-cells, as well as thymocyte development. Contributes also to the development and activation of primary B-lymphocytes. When antigen presenting cells (APC) activate T-cell receptor (TCR), a serie of phosphorylations lead to the recruitment of ZAP70 to the doubly phosphorylated TCR component CD247/CD3Z through ITAM motif at the plasma membrane. This recruitment serves to localization to the stimulated TCR and to relieve its autoinhibited conformation. Release of ZAP70 active conformation is further stabilized by phosphorylation mediated by LCK. Subsequently, ZAP70 phosphorylates at least 2 essential adapter proteins: LAT and LCP2. In turn, a large number of signaling molecules are recruited and ultimately lead to lymphokine production, T-cell proliferation and differentiation. Furthermore, ZAP70 controls cytoskeleton modifications, adhesion and mobility of T-lymphocytes, thus ensuring correct delivery of effectors to the APC. ZAP70 is also required for TCR-CD247/CD3Z internalization and degradation through interaction with the E3 ubiquitin-protein ligase CBL and adapter proteins SLA and SLA2. Thus, ZAP70 regulates both T-cell activation switch on and switch off by modulating TCR expression at the T-cell surface. During thymocyte development, ZAP70 promotes survival and cell-cycle progression of developing thymocytes before positive selection (when cells are still CD4/CD8 double negative). Additionally, ZAP70-dependent signaling pathway may also contribute to primary B-cells formation and activation through B-cell receptor (BCR).
Subunit ：
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书技术外包服务:
★分子生物学：质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物学：基因合成、引物合成、基因测序、载体构建等
★蛋白工程：原核、哺乳动物蛋白表达系统等
★病毒包装：腺病毒、慢病毒等
★抗体工程：磁珠分选、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等
★细胞工程：细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)、细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术等等。
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
绵羊白介素2(IL-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人脂多糖结合蛋白(LBP)免疫试剂盒 Human LBP ELISA Kit
淋巴毒素α(LTA)ELISA试剂盒 ，英文名： LTA ELISA Kit
RatCaspase-9,Casp-9ELISA试剂盒大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISA试剂盒人协同刺激分子受体(CMR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Humanfreefattyacids，FFAELISAKit人游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书大鼠基质金属蛋白酶13 英文名称： maix metalloproteinase 13 规格： 48T/96T 英文缩写： MMP-13
大鼠β2-微球蛋白 英文名称： β2-microglobulin 规格： 48T/96T 英文缩写： β2-MG
大鼠MK 英文名称： Midkine 规格： 48T/96T 英文缩写： Midkine
大鼠N端脑钠素前体 英文名称： Rat N.Terminal proBrain Naiu
磷酸化zeta相关蛋白70抗体说明书抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
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文献和实验相关实验
原理。PKC底物被包被在酶标板上，在ATP存在的前提下，PKC激酶将底物磷酸化，洗掉游离的PKC激酶和其他成分。再加入特异性磷酸化抗体（只识别磷酸化底物，而与非磷酸化底物无交叉反应。）检测残留在酶标板上的磷酸化底物。通过酶标二抗放大信号，读出OD值（蛋白激酶活性与OD值的对数成正比）。与对照组相比，得出处理组的蛋白激酶活性 （PKA, PKB, PKC, SGK, S6K和Tyrosine Kinase）等非放射性蛋白激酶分析测试盒http://www.immunechem.com 本文
能啊？ snowden007 你好，我也是做出来两条带，知道为什么吗？ 卡卡西23 查看抗体说明书。上面那条是不是磷酸化的，加了磷分子量变大，与非磷酸化分开。或者抗体可以压两种亚基？ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
wx275411643 麻烦哪位高手帮助解答一下我现在做WB遇到的情况，我买的抗体说明书上写的目的条带分子量和实际曝光出来的不一样，Marker肯定没问题了，是国内公司的抗体，问过公司，他们说是蛋白被修饰了，所以会大点。我做的结果比说明书上的大了大概10KD（书上说39KD），不知道公司的解释能不能接受？抗体是多克隆的。就怕他们用别的抗体冒充我要的。 zhe992000 看看你的蛋白质的分子量有没有问题？好多时候，蛋白在翻译
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