- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Dog Blood With EDTA
- 保质期:
5年
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
冷冻
血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
7.内毒素极低,其次无菌过滤,最后三次为0.1um无菌过滤处理。
8.进行细菌、真菌、支原体、病毒及病毒抗体检测,符合国际动物协会要求
9.建议使用范围:科研使用,细胞培养
10.储存:-20℃冻存,避免反复冻融
鉴别方法:
血液凝结析出的淡黄色通明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反响被激活,血液敏捷凝结,构成胶冻。其周围所析出之淡黄色通明液体即为血清,也可于凝血后经离心获得。在凝血过程中,纤维蛋白原转成为纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆zui大的差异。而在凝血反响中,血小板开释出很多物质,各凝血因子也都发生了改变。这些成分都留在血清中并持续发生改变,如凝血酶原成为凝血酶,并随血清寄存时刻逐步削减以致不见。这些也都是与血浆差异的地方。但很多未参与凝血反响的物质则与血浆根本一样。为防止抗凝剂的搅扰,血液中很多化学成分的剖析,都以血清为样品。
首要效果:
●供给根本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞成长有必要的物质。
●供给激素和各种成长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。成长因子如成纤维细胞成长因子、表皮成长因子、血小板成长因子等。
●供给蛋白:蛋白效果是带着主要地低分子量物质,如白蛋着维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋蛋白着铁。蛋白在细胞代谢过程中起主要效果。
●供给促接触和扩展因子使细胞贴壁免受机械损害。
●对培育中的细胞起到某些维护效果:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞能够开释蛋白酶,血清中富含抗蛋白酶成分,起到中和效果。这种效果是偶然发现的,如今则有意图的运用血清来终止胰蛋白酶的消化效果。由于胰蛋白酶现已被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白构成了血清的粘度,能够维护细胞免受机械损害,特别是在悬浮培育拌和时,粘度起到主要效果。血清还富含一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起主要效果,如SeO3,硒等。
血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但*普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400 g 稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
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文献和实验外周血是我们流式实验中常用到的样本之一。由于血液离体后会在凝血因子的作用下凝固(图1),采集外周血样本时,需要使用带抗凝剂的采血管,或采集后立即加入抗凝剂。通常,我们流式实验中用到的抗凝剂有两种:EDTA 和肝素。 图1:凝血(左)与抗凝(右)效果展示 1 两种抗凝剂的抗凝原理 EDTA(乙二胺四乙酸): EDTA 能与血液中的 Ca2+ 螯合,使 Ca2+ 失去凝血作用,阻止血液凝固。常用的是钠盐或钾盐。 肝素: 加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶的作用,阻止凝血酶的形成和血
0.5M EDTA FW M L pH8.0 xg = 292.25 0.5 0.5 **93.06g** Add to about 300mls H2 O while spinning
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